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目的:探讨二氮嗪对双氧水诱导的软骨细胞氧化损伤的影响。方法:取SD乳鼠膝关节软骨细胞进行原代培养,将对数生长期的软骨细胞分成5组,分别为阴性对照组(A组),双氧水组(B组),H2 O2+0.1μmol·L-1二氮嗪组(C组),H2 O2+1.0μmol·L-1二氮嗪组(D组),H2 O2+10μmol·L-1二氮嗪组(E组);A组细胞不做特殊处理,B组用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4 h,C、D、E、F组预先分别用0.1μmol·L-1 DZ,1.0μmol·L-1 DZ,10μmol·L-1 DZ,100μmol·L-1在37℃的恒温箱孵育30分钟,PBS洗涤细胞,再用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4小时。分别检测ABCDE各组细胞的细胞活性,ROS的量,细胞凋亡情况。结果:①MTT法检测各组细胞活性,细胞活性率从大至小依次为D组>C组>E组>F组>B组;②用活性氧探针DCFH-DA检测各组细胞中的ROS的量,ROS产量从多至少依次为B组>E组>D组>C组>A组;③流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,各组细胞凋亡率由大至小依次为B组>E 组>D组>C组。④Western bolt检测各组软骨细胞中HIF-1α蛋白的表达,各组软骨细胞中HIF-1α蛋白表达量依次为C组>D组>E组>A组>B组。结论:二氮嗪可降低双氧水诱导的软骨细胞的凋亡率,同时也降低双氧水诱导的软

作者:彭磊;程少文;沈跃;应晓洲;赵志蓉;安涛;周英勇;程晓杰;陈庆玉;吕传柱

来源:中医正骨 2014 年 5期

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作者:
彭磊;程少文;沈跃;应晓洲;赵志蓉;安涛;周英勇;程晓杰;陈庆玉;吕传柱
来源:
中医正骨 2014 年 5期
标签:
二氮嗪 软骨细胞 活性氧 凋亡 Diazoxide Chondrocytes Reactive oxygen species Apoptosis
目的:探讨二氮嗪对双氧水诱导的软骨细胞氧化损伤的影响。方法:取SD乳鼠膝关节软骨细胞进行原代培养,将对数生长期的软骨细胞分成5组,分别为阴性对照组(A组),双氧水组(B组),H2 O2+0.1μmol·L-1二氮嗪组(C组),H2 O2+1.0μmol·L-1二氮嗪组(D组),H2 O2+10μmol·L-1二氮嗪组(E组);A组细胞不做特殊处理,B组用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4 h,C、D、E、F组预先分别用0.1μmol·L-1 DZ,1.0μmol·L-1 DZ,10μmol·L-1 DZ,100μmol·L-1在37℃的恒温箱孵育30分钟,PBS洗涤细胞,再用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4小时。分别检测ABCDE各组细胞的细胞活性,ROS的量,细胞凋亡情况。结果:①MTT法检测各组细胞活性,细胞活性率从大至小依次为D组>C组>E组>F组>B组;②用活性氧探针DCFH-DA检测各组细胞中的ROS的量,ROS产量从多至少依次为B组>E组>D组>C组>A组;③流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,各组细胞凋亡率由大至小依次为B组>E 组>D组>C组。④Western bolt检测各组软骨细胞中HIF-1α蛋白的表达,各组软骨细胞中HIF-1α蛋白表达量依次为C组>D组>E组>A组>B组。结论:二氮嗪可降低双氧水诱导的软骨细胞的凋亡率,同时也降低双氧水诱导的软