目的 从人脐静脉内皮细胞(HUVECs)外泌体及人主动脉血管平滑肌细胞(HAVSMCs)表型转化角度探讨温心方治疗冠心病的可能作用机制.方法 30只SD大鼠给予温心方水煎剂33.75 g/(kg·d)灌胃,连续7天,末次灌胃2 h后腹主动脉取血制备含药血清.取对数生长期的HUVECs,分别设立对照组、模型组及温心方高、中、低剂量组,对照组使用完全培养基培养,温心方高、中、低剂量组分别用5％、15％、25％温心方含药血清培养24 h后加入50 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)培养24h,模型组仅加入50mg/L ox-LDL培养24h造模.各组高速离心分离获取HUVECs外泌体,透射电镜观察外泌体形态,BCA法测定外泌体蛋白浓度,检测外泌体粒径,Western Blot法检测外泌体标志蛋白溶酶体相关膜蛋白3(CD63)、肿瘤易感基因101(TSG101)表达,qRT-PCR法检测外泌体miR-145表达.各组HUVECs外泌体50 ng与HAVSMCs共培养24h,观察外泌体摄取,于6、12、24、48 h应用MTT法检测HAVSMCs细胞增殖率,Transwell法检测细胞迁移能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western Blot法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22α蛋白(SM22α)、骨桥蛋白(OPN)水平.结果 成功提取HUVECs外泌体,在镜下可见HAVSMCs细胞摄取HUVECs外泌体.模型组HUVECs外泌体中CD63、TSG101及miR-145表达较对照组

作者：李金霞；付依敏；许英姿；宗文静；曹洪欣；刘旺华；郑彩杏

来源：中医杂志 2023 年 64卷 16期