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目的 构建一种缓释FGF2基因的"核壳"结构的壳聚糖缓释微球,"核"是包埋FGF2基因质粒的巯基烷基化壳聚糖(TACS)、"壳"是羟丁基壳聚糖(HBC).探讨该壳聚糖核壳微球对颗粒脂肪移植存活率的影响.方法 制备HBC@TACS-pFGF2-EGFP壳核缓释微球,检测该壳核结构包载基因相较于核结构包载基因缓释的释放规律. Western-blot检测该缓释微球体外转染293T细胞后表达FGF2蛋白的情况.取18只新西兰白兔用于颗粒脂肪移植实验.兔左耳作为实验组,移植 2 mL 脂肪颗粒和 HBC@TACS-pFGF2-EGFP,兔右耳作为对照组,移植 2 mL 脂肪颗粒和HBC@TACS-空载质粒.分别于颗粒脂肪移植术后第4周、第8周、第12周切取标本,并行大体观察、HE染色、免疫组化染色,观察移植物的生物学特性、脂肪移植成活率及新生血管密度.结果 HBC@TACS-pFGF2-EGFP在体外可缓慢释放pFGF2-EGFP基因,而且在转染293T细胞后可成功表达FGF2蛋白.颗粒脂肪移植术后不同时间点取材,发现移植后的脂肪组织体积随时间推移逐渐减小,整个实验过程中实验组的脂肪移植成活率均大于对照组(P<0.05);HE染色显示,实验组的新生脂肪组织细胞排列较对照组更为规则;免疫组化染色显示,实验组脂肪组织的新生血管密度高于对照组(P<0.05).结论 缓释FGF2基因的HBC@TACS-pFGF2-EGFP微球可提高颗粒脂

作者:马莉;蒋思静;贾大平;赵宇

来源:组织工程与重建外科杂志 2018 年 14卷 5期

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作者:
马莉;蒋思静;贾大平;赵宇
来源:
组织工程与重建外科杂志 2018 年 14卷 5期
标签:
基因治疗 颗粒脂肪移植 碱性成纤维细胞生长因子 Gene therapy Adipose tissue transplantation Basic fibroblast growth factor
目的 构建一种缓释FGF2基因的"核壳"结构的壳聚糖缓释微球,"核"是包埋FGF2基因质粒的巯基烷基化壳聚糖(TACS)、"壳"是羟丁基壳聚糖(HBC).探讨该壳聚糖核壳微球对颗粒脂肪移植存活率的影响.方法 制备HBC@TACS-pFGF2-EGFP壳核缓释微球,检测该壳核结构包载基因相较于核结构包载基因缓释的释放规律. Western-blot检测该缓释微球体外转染293T细胞后表达FGF2蛋白的情况.取18只新西兰白兔用于颗粒脂肪移植实验.兔左耳作为实验组,移植 2 mL 脂肪颗粒和 HBC@TACS-pFGF2-EGFP,兔右耳作为对照组,移植 2 mL 脂肪颗粒和HBC@TACS-空载质粒.分别于颗粒脂肪移植术后第4周、第8周、第12周切取标本,并行大体观察、HE染色、免疫组化染色,观察移植物的生物学特性、脂肪移植成活率及新生血管密度.结果 HBC@TACS-pFGF2-EGFP在体外可缓慢释放pFGF2-EGFP基因,而且在转染293T细胞后可成功表达FGF2蛋白.颗粒脂肪移植术后不同时间点取材,发现移植后的脂肪组织体积随时间推移逐渐减小,整个实验过程中实验组的脂肪移植成活率均大于对照组(P<0.05);HE染色显示,实验组的新生脂肪组织细胞排列较对照组更为规则;免疫组化染色显示,实验组脂肪组织的新生血管密度高于对照组(P<0.05).结论 缓释FGF2基因的HBC@TACS-pFGF2-EGFP微球可提高颗粒脂