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目的 探讨脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,Fas)基因沉默对帕金森病大鼠脑纹状体多巴胺能神经元凋亡的影响及机制.方法 取40只大鼠,30只大鼠脑纹状体注射4μL 6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine Hydrobromide,6-OHDA)建立帕金森病大鼠模型,剩余10只为假手术组,脑纹状体注射等量2 g/L抗坏血酸的生理盐水;取建模成功的27只大鼠并随机分为模型组、阴性对照组和沉默组,每组各9只;阴性对照组和沉默组分别向大鼠纹状体内注射3μL含无义序列的短片断干扰RNA(Small interfer RNA,siRN A)和Fas siRN A,模型组和假手术组分别向大鼠纹状体内注射等量生理盐水;干预1周后实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot检测大鼠纹状体多巴胺能神经元Fas mRNA和蛋白相对表达水平,苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察大鼠纹状体多巴胺能神经元损伤情况,原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick and labeling,TUNEL)染色检测大鼠纹状体多巴胺能神经元凋亡,RT-qPCR,Western blot检测纹状体多巴胺能神经元Fas配体(Fas Lig-and,Fasl)、Fas相关死亡结构域蛋白(Fas-associateddeathdomain,FADD)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Cyste-ine containing aspartate-s

作者:刘会星;马建法;王阳;吴少璞

来源:卒中与神经疾病 2021 年 28卷 3期

知识库介绍

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作者:
刘会星;马建法;王阳;吴少璞
来源:
卒中与神经疾病 2021 年 28卷 3期
标签:
帕金森病 纹状体 多巴胺能神经元 脂肪酸合成酶 脂肪酸合成酶配体 相关死亡结构域蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8
目的 探讨脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,Fas)基因沉默对帕金森病大鼠脑纹状体多巴胺能神经元凋亡的影响及机制.方法 取40只大鼠,30只大鼠脑纹状体注射4μL 6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine Hydrobromide,6-OHDA)建立帕金森病大鼠模型,剩余10只为假手术组,脑纹状体注射等量2 g/L抗坏血酸的生理盐水;取建模成功的27只大鼠并随机分为模型组、阴性对照组和沉默组,每组各9只;阴性对照组和沉默组分别向大鼠纹状体内注射3μL含无义序列的短片断干扰RNA(Small interfer RNA,siRN A)和Fas siRN A,模型组和假手术组分别向大鼠纹状体内注射等量生理盐水;干预1周后实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot检测大鼠纹状体多巴胺能神经元Fas mRNA和蛋白相对表达水平,苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察大鼠纹状体多巴胺能神经元损伤情况,原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick and labeling,TUNEL)染色检测大鼠纹状体多巴胺能神经元凋亡,RT-qPCR,Western blot检测纹状体多巴胺能神经元Fas配体(Fas Lig-and,Fasl)、Fas相关死亡结构域蛋白(Fas-associateddeathdomain,FADD)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Cyste-ine containing aspartate-s