目的 探讨热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(Carboxylterminus of Hsp70 interacting pro-tein,CHIP)过表达对缺氧(Hypoxia,H)/复氧(Reoxygenation,R)诱导下受体相互作用蛋白激酶3(Receptor-interacting protein kinase 3,RIPK3)介导的神经细胞程序性死亡的影响.方法 将体外培养的小鼠脑神经瘤(Mouse neuroblastoma N2a cells,Neuro-2a)细胞分为正常组(正常培养)、H/R组(构建H/R模型)、H/R+空载体组(转染pcDNA 3.1空载体质粒后构建H/R模型)和H/R+CHIP过表达组(转染pcDNA 3.1-CHIP过表达质粒后构建H/R模型);采用实时荧光量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)检测细胞中CHIP mRNA相对表达水平;免疫印迹法(Western blotting)检测细胞中CHIP,RIPK3和混合系列蛋白激酶样结构域(Mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)蛋白相对表达水平;细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)漏出量和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平;2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2,7-Di-chlorodi hy
作者:严澎;李文波;李元辉;王玮;高玉霞
来源:卒中与神经疾病 2021 年 28卷 5期