目的 利用AdEasy系统构建鼠内皮抑素(ES)基因重组腺病毒Ad.ES,并观察其在人肺腺癌细胞SPCA-1的表达.方法 采用酶切、连接和转化等方法,将质粒pcDNA3.ES中的ES片段插入腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack.CMV,构建...
来源:《中国现代医学杂志》 2008 年 18卷 6期
目的:利用AdEasy腺病毒载体系统,构建小鼠降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因重组腺病毒载体,并验证其在心肌细胞中的表达.方法:采用RT-PCR方法扩增出含有小鼠CGRP全长cDNA的基...
来源:《浙江大学学报(医学版)》 2010 年 39卷 3期
目的 探讨在体内试验中携带人白介素(hIL)-10基因的腺病毒是否有较高的转染效率、能够发挥抗炎和抗纤维化的作用以及hIL-10表达时间的长短.方法 向四氯化碳(CCl4)诱导的肝脏纤维化模型大鼠尾静脉中注射含...
来源:《安徽医科大学学报》 2012 年 47卷 12期
目的:对细菌内同源重组法构建重组腺病毒AdEasy系统加以改进,为制备具有更高抗肿瘤疗效的生物治疗制剂奠定基础.方法:将自杀基因CD和HSV-TK插入穿梭质粒pAdTrack-CMV中,PmeⅠ酶切后,用酚:氯仿抽提、乙醇沉...
来源:《天津医药》 2005 年 33卷 7期
目的 构建携带EGFP标志人白细胞介素10(hIL-10)基因腺病毒载体.方法 以pSNAV2.0-hIL-10重组质粒为模板.PCR扩增hIL-10基因,获得hIL-10 cDNA片段,并酶切连接到带有含强绿色荧光蛋白基因(EGFP)标记的pDC316...
来源:《临床麻醉学杂志》 2009 年 25卷 1期
腺病毒作为载体具有许多优点,因此被广泛地应用于体外基因转导、体内接种疫苗和基因治疗等领域.近年来,国内外学者已经构建了表达不同抗原的腺病毒载体,如人(猿)免疫缺陷病毒Gag,pol,Nef,Env,狂犬病毒糖蛋...
来源:《微生物学免疫学进展》 2007 年 35卷 3期
目的 通过密码子优化提高重组腺病毒中人轮状病毒VP6基因的表达量.方法 人工合成按照人的优势密码子优化的人轮状病毒VP6基因,包装重组腺病毒后,与未优化的相同基因的重组腺病毒用免疫荧光和Western Blot...
来源:《中华实验和临床病毒学杂志》 2011 年 25卷 6期
目的 研究腺病毒载体介导的β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因在小鼠肝脏的分布及表达情况,评价腺病毒载体作为基因治疗转导系统的有效性及安全性.为进一步的目的 基因导入及表达奠定基础.方法 将Balb/cJ小鼠随...
来源:《实用肝脏病杂志》 2012 年 15卷 3期
目的 构建表达抗G250人源性抗体的增殖缺陷型腺病毒.方法 通过重叠延伸PCR、常规PCR方法,分别获得G250重链的可变区和恒定区(GH)cDNA序列及G250轻链(GL) cDNA序列,并克隆至pCLON12-IRES载体上,构建质粒pC...
来源:《徐州医学院学报》 2013 年 33卷 1期
目的 探讨2006年2月下旬汕头市某小学暴发的一起急性上呼吸道病毒感染的病原学.方法 采集患者急性期咽拭子标本进行腺病毒、B型流感病毒和呼吸道合胞病毒的核酸检测.对PCR结果进行序列测定和分析;咽拭子标...
来源:《华南预防医学》 2007 年 33卷 1期