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目的:研究miR-21在三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达,以及其是否通过调控PDCD4影响MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭.方法:采用实时定量PCR(qPCR)法检测MDA-MB-231细胞和正常乳腺细胞MCF-10A中miR-21和PDCD4 mRNA的表达.将MDA-MB-231细胞随机分为5组:空白对照组,转染miR-21模拟物组,模拟物对照组,转染miR-21抑制物组和抑制物对照组.采用Western blot法检测MDA-MB-231细胞PDCD4蛋白的表达;采用荧光素酶报告基因试剂盒检测转染不同载体后荧光强度的变化来判断miR-21的靶标;采用Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭数目.结果:miR-21和PDCD4 mRNA在MDA-MB-231细胞中的表达水平分别明显高于和低于MCF-10A细胞(P均<0.01).过表达或抑制miR-21可调节PDCD4的表达水平.荧光素酶报告基因试剂盒检测结果显示miR-21可直接靶向调控PDCD4的表达.Transwell实验结果表明过表达miR-21表达能增强MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力.结论:在MDA-MB-231细胞中,miR-21通过靶向调控PDCD4表达影响细胞的迁移和侵袭.miR-21可能成为抑制三阴性乳腺癌迁移和侵袭的靶点.

作者:陈绵龄;马硕一

来源:癌变·畸变·突变 2020 年 32卷 4期

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作者:
陈绵龄;马硕一
来源:
癌变·畸变·突变 2020 年 32卷 4期
标签:
三阴性乳腺癌 miR-21 PDCD4 迁移 侵袭
目的:研究miR-21在三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达,以及其是否通过调控PDCD4影响MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭.方法:采用实时定量PCR(qPCR)法检测MDA-MB-231细胞和正常乳腺细胞MCF-10A中miR-21和PDCD4 mRNA的表达.将MDA-MB-231细胞随机分为5组:空白对照组,转染miR-21模拟物组,模拟物对照组,转染miR-21抑制物组和抑制物对照组.采用Western blot法检测MDA-MB-231细胞PDCD4蛋白的表达;采用荧光素酶报告基因试剂盒检测转染不同载体后荧光强度的变化来判断miR-21的靶标;采用Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭数目.结果:miR-21和PDCD4 mRNA在MDA-MB-231细胞中的表达水平分别明显高于和低于MCF-10A细胞(P均<0.01).过表达或抑制miR-21可调节PDCD4的表达水平.荧光素酶报告基因试剂盒检测结果显示miR-21可直接靶向调控PDCD4的表达.Transwell实验结果表明过表达miR-21表达能增强MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力.结论:在MDA-MB-231细胞中,miR-21通过靶向调控PDCD4表达影响细胞的迁移和侵袭.miR-21可能成为抑制三阴性乳腺癌迁移和侵袭的靶点.