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目的 探讨在脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)诱导Barrett食管(Barrett's esophagus,BE)形成中,Krüppel样锌指转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)与同源异型框转录因子2(caudalrelated homeodomain transcription factor 2,CDX2)的作用.方法 采用免疫组化S-P法检测49例人正常食管组织和22例BE组织中KLF4、CDX2的表达;体外培养Het-1A细胞,依据DCA处理时间分为0h组(未经DCA处理)、4h组、8h组、12 h组并进行DCA处理.分别设置空白对照组、阴性siRNA对照组、阴性siRNA +DCA处理12 h组、KLF4-siRNA干扰组、KLF4-siRNA干扰+DCA处理12 h组,进行相应处理.设置空白对照组、阴性病毒对照组、阴性病毒+DCA处理12 h组、KLF4过表达病毒组,进行相应处理.待上述各实验组处理结束后,运用Real-time PCR、Western blot检测各组KLF4、CDX2、MUC2mRNA及蛋白的表达.结果 免疫组化检测发现:在22例BE组织中,KLF4阳性表达15例,阳性率68.18%,阳性染色主要集中在细胞核;CDX2阳性表达16例,阳性率72.73%,阳性染色也主要集中在细胞核.与人正常食管鳞状上皮组织比较,BE组织中KLF4、CDX2表达均增高(x2=18.642,P<0.05;x2=23.678,P<0.05).Real-time PCR及Western blot检测结果显示:随DCA处理时间的增加,Het-1A细胞KLF4、CDX2、MUC2

作者:闫武;张昊翔;沈才飞;夏一菊;王璞;张亚飞;李婧文;徐胤;邵顺子

来源:第三军医大学学报 2016 年 38卷 7期

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闫武;张昊翔;沈才飞;夏一菊;王璞;张亚飞;李婧文;徐胤;邵顺子
来源:
第三军医大学学报 2016 年 38卷 7期
标签:
Barrett食管 Het-1A细胞 脱氧胆酸 Krüppel样锌指转录因子4 同源异型框转录因子2 Barett's esophagus Het-1A cells deoxycholic acid Krüppel-like factor 4 caudal-related homeodomain transcription factor 2
目的 探讨在脱氧胆酸(deoxycholic acid,DCA)诱导Barrett食管(Barrett's esophagus,BE)形成中,Krüppel样锌指转录因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)与同源异型框转录因子2(caudalrelated homeodomain transcription factor 2,CDX2)的作用.方法 采用免疫组化S-P法检测49例人正常食管组织和22例BE组织中KLF4、CDX2的表达;体外培养Het-1A细胞,依据DCA处理时间分为0h组(未经DCA处理)、4h组、8h组、12 h组并进行DCA处理.分别设置空白对照组、阴性siRNA对照组、阴性siRNA +DCA处理12 h组、KLF4-siRNA干扰组、KLF4-siRNA干扰+DCA处理12 h组,进行相应处理.设置空白对照组、阴性病毒对照组、阴性病毒+DCA处理12 h组、KLF4过表达病毒组,进行相应处理.待上述各实验组处理结束后,运用Real-time PCR、Western blot检测各组KLF4、CDX2、MUC2mRNA及蛋白的表达.结果 免疫组化检测发现:在22例BE组织中,KLF4阳性表达15例,阳性率68.18%,阳性染色主要集中在细胞核;CDX2阳性表达16例,阳性率72.73%,阳性染色也主要集中在细胞核.与人正常食管鳞状上皮组织比较,BE组织中KLF4、CDX2表达均增高(x2=18.642,P<0.05;x2=23.678,P<0.05).Real-time PCR及Western blot检测结果显示:随DCA处理时间的增加,Het-1A细胞KLF4、CDX2、MUC2