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目的 探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)源外泌体(exosomes)对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生的调控作用及其长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)表达的影响.方法 采用差速超速离心法提取大鼠BMSCs源外泌体,并通过Western blot和透射电镜对其进行鉴定.SD大鼠分为3组:①假手术组(只分离左颈总动脉血管);②损伤组(左颈总动脉采用球囊损伤);③外泌体组(建立大鼠颈动脉球囊损伤模型后原位注射0.25 μg/μL外泌体400 μL),14 d后采用HE染色观测颈动脉内膜/中膜面积比(intima/media,I/M)、免疫组化检测PCNA表达、Western blot检测血管内膜增殖及表型转化相关指标的变化.采用lncRNA-mRNA共表达谱芯片表达变化及其生物信息学分析筛查假手术组和损伤组大鼠颈动脉组织中差异表达的lncRNAs和mRNAs,对其潜在分子机制进行探讨.采用qRT-PCR检测各组颈动脉组织中候选lncRNAs的表达.结果 电镜结果显示BMSCs源外泌体呈现"茶杯垫样"改变,Western blot结果显示所提取的外泌体中CD63、Alix、HSP70蛋白表达阳性.与损伤组相比,经BMSCs源外泌体处理后大鼠颈动脉I/M显著减少(P<0.05),增殖相关蛋白PCNA、Cyclin D1表达下调(P<0.05).lncRNA-mRNA共表达谱芯片检测结果,与假手术组相比,损伤

作者:龙禹哲;郭鸿浩;杨双亚;陈文明;邓文文;石蓓

来源:第三军医大学学报 2020 年 42卷 23期

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作者:
龙禹哲;郭鸿浩;杨双亚;陈文明;邓文文;石蓓
来源:
第三军医大学学报 2020 年 42卷 23期
标签:
骨髓间充质干细胞 外泌体 颈动脉损伤 长链非编码RNA
目的 探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)源外泌体(exosomes)对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生的调控作用及其长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)表达的影响.方法 采用差速超速离心法提取大鼠BMSCs源外泌体,并通过Western blot和透射电镜对其进行鉴定.SD大鼠分为3组:①假手术组(只分离左颈总动脉血管);②损伤组(左颈总动脉采用球囊损伤);③外泌体组(建立大鼠颈动脉球囊损伤模型后原位注射0.25 μg/μL外泌体400 μL),14 d后采用HE染色观测颈动脉内膜/中膜面积比(intima/media,I/M)、免疫组化检测PCNA表达、Western blot检测血管内膜增殖及表型转化相关指标的变化.采用lncRNA-mRNA共表达谱芯片表达变化及其生物信息学分析筛查假手术组和损伤组大鼠颈动脉组织中差异表达的lncRNAs和mRNAs,对其潜在分子机制进行探讨.采用qRT-PCR检测各组颈动脉组织中候选lncRNAs的表达.结果 电镜结果显示BMSCs源外泌体呈现"茶杯垫样"改变,Western blot结果显示所提取的外泌体中CD63、Alix、HSP70蛋白表达阳性.与损伤组相比,经BMSCs源外泌体处理后大鼠颈动脉I/M显著减少(P<0.05),增殖相关蛋白PCNA、Cyclin D1表达下调(P<0.05).lncRNA-mRNA共表达谱芯片检测结果,与假手术组相比,损伤