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目的 研究Notch1信号通路在新生期小鼠肺炎链球菌感染诱导Th1/Th2失衡中的作用.方法 12只1周龄Balb/c新生小鼠分为3组(n=4):新生期肺炎链球菌肺炎(Streptococcus pneumoniae pneumonia,S.pp)组、新生期肺炎链球菌肺炎Notch1抑制组[S.pp+DAPT(γ分泌酶抑制剂)]和对照组.S.pp组、S.pp+DAPT组小鼠鼻腔滴注10 μL含有1×107cfu肺炎链球菌的悬液,对照组同期滴注等量PBS.小鼠感染肺炎链球菌后第7天,S.pp+DAPT组鼻腔滴注0.3 mg/kg的Notch1抑制剂DAPT,S.pp组和对照组鼻腔滴注等量PBS.小鼠发育至6周(成年),检测气道反应性,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行细胞分类计数,肺组织HE染色病理切片观察组织病理变化;Western blot检测肺组织Notch1蛋白水平;RT-PCR检测肺组织T-bet、GATA3 mRNA水平;流式细胞术检测肺组织Th1、Th2细胞水平并分析Th1/Th2比率.结果 S.pp+DAPT组Notch1蛋白表达显著低于S.pp 组(0.23+0.09 vs 1.94±0.78,P<0.01).S.pp+DAPT 组 BALF 细胞总数、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞计数均明显低于S.pp组(P<0.01);肺组织中细支气管周围炎症(0.55±0.17vs1.52±0.27,P<0.01)、血管周围炎症(0.05±0.10 vs 0.88±0.25,P<0.01)、肺间质炎症评分(0.18±0.35 vs 1.57±0.25,P

作者:王艺颖;简鼎;朱琳;张瀚之;李媛媛;陈诗懿;张光莉;罗征秀

来源:陆军军医大学学报 2022 年 44卷 21期

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作者:
王艺颖;简鼎;朱琳;张瀚之;李媛媛;陈诗懿;张光莉;罗征秀
来源:
陆军军医大学学报 2022 年 44卷 21期
标签:
肺炎链球菌肺炎 Notch Th1/Th2 新生期小鼠
目的 研究Notch1信号通路在新生期小鼠肺炎链球菌感染诱导Th1/Th2失衡中的作用.方法 12只1周龄Balb/c新生小鼠分为3组(n=4):新生期肺炎链球菌肺炎(Streptococcus pneumoniae pneumonia,S.pp)组、新生期肺炎链球菌肺炎Notch1抑制组[S.pp+DAPT(γ分泌酶抑制剂)]和对照组.S.pp组、S.pp+DAPT组小鼠鼻腔滴注10 μL含有1×107cfu肺炎链球菌的悬液,对照组同期滴注等量PBS.小鼠感染肺炎链球菌后第7天,S.pp+DAPT组鼻腔滴注0.3 mg/kg的Notch1抑制剂DAPT,S.pp组和对照组鼻腔滴注等量PBS.小鼠发育至6周(成年),检测气道反应性,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行细胞分类计数,肺组织HE染色病理切片观察组织病理变化;Western blot检测肺组织Notch1蛋白水平;RT-PCR检测肺组织T-bet、GATA3 mRNA水平;流式细胞术检测肺组织Th1、Th2细胞水平并分析Th1/Th2比率.结果 S.pp+DAPT组Notch1蛋白表达显著低于S.pp 组(0.23+0.09 vs 1.94±0.78,P<0.01).S.pp+DAPT 组 BALF 细胞总数、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞计数均明显低于S.pp组(P<0.01);肺组织中细支气管周围炎症(0.55±0.17vs1.52±0.27,P<0.01)、血管周围炎症(0.05±0.10 vs 0.88±0.25,P<0.01)、肺间质炎症评分(0.18±0.35 vs 1.57±0.25,P