目的:探讨人单核细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达是否受核因子κB(NF-κB)调控. 方法: 人单核细胞分别给予脂多糖(LPS)、LPS加二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)、空白对照刺激培养. 提取核蛋白进行NF-κB的电泳移动迁移率改变试验(EMSA);提取RNA进行iNOS的RT-PCR;提取总蛋白进行iNOS的Western blotting;并留细胞爬片进行p65亚基的免疫荧光检测和iNOS的免疫酶学检测. 结果: LPS刺激1 h后,单核细胞p65核表达阳性率及核蛋白NF-κB的DNA结合活性均较空白刺激组明显增加(P<0.05),而LPS+PDTC组p65核表达阳性率及NF-κB的DNA结合活性均较LPS组明显降低(P<0.05);LPS刺激10 h后,单核细胞iNOS mRNA的表达较空白刺激组明显增加(P<0.05),而LPS+PDTC组iNOSmRNA表达较LPS组明显降低(P<0.05);LPS刺激24 h后,单核细胞iNOS蛋白表达量(不论是Western blot,还是免疫组化结果)均较未刺激组明显增加(P<0.05),而LPS+PDTC组均较LPS组明显降低(P<0.05);NF-κB核表达阳性率与iNOS mRNA、蛋白表达量成正相关;NF-κB的DNA结合活性亦与iNOS mRNA和蛋白表达量成正相关. 结论: NF-κB的激动剂能促进人单核细胞iNOS的表达,且这种促进作用是首先出现在mRNA水平,而NF-κB的抑制剂能阻断这种促进作用. 提示NF-κB能正调控人单核细胞iNOS基因

作者：张宁；徐永健；张珍祥

来源：第四军医大学学报 2004 年 25卷 12期