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Wap65-2 (warm temperature acclimation related 65 kDa protein-2)是鱼类中发现的一种血浆糖蛋白,与细菌感染性免疫应激紧密相关.该研究首次克隆了花鲈Wap65-2基因全长cDNA序列.它由1 601个核苷酸组成,包含一个大的开放阅读框,预期编码一个由436个氨基酸组成、相对分子质量为4.87×104的前体蛋白,N端19个残基为信号肽序列.序列和系统进化树分析表明,花鲈Wap65-2与欧洲海鲈进化关系最近,两者氨基酸同源性高达80.7%.健康花鲈Wap65-2基因mRNA主要在肝中表达,心和肌肉中少量表达.qRT-PCR分析揭示,哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染感染12 h后,花鲈肝中Wap65-2基因mRNA表达显著上调,24 h时达到峰值,为健康对照的6.89倍.原核表达花鲈Wap65-2并制备抗血清.Western blot分析表明,哈维氏弧菌感染12 h后,花鲈血清中Wap65-2含量显著增加,36 h时达到最大值,为健康对照的5.33倍.综上所述,花鲈Wap65-2基因的表达与其细菌感染性免疫应激紧密相关.

作者:史雨红;陈炯;高姗姗;沈广强;陆新江;李明云

来源:动物学研究 2012 年 33卷 5期

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作者:
史雨红;陈炯;高姗姗;沈广强;陆新江;李明云
来源:
动物学研究 2012 年 33卷 5期
标签:
Wap65-2基因 花鲈 哈维氏弧菌 实时荧光定量PCR Western blot
Wap65-2 (warm temperature acclimation related 65 kDa protein-2)是鱼类中发现的一种血浆糖蛋白,与细菌感染性免疫应激紧密相关.该研究首次克隆了花鲈Wap65-2基因全长cDNA序列.它由1 601个核苷酸组成,包含一个大的开放阅读框,预期编码一个由436个氨基酸组成、相对分子质量为4.87×104的前体蛋白,N端19个残基为信号肽序列.序列和系统进化树分析表明,花鲈Wap65-2与欧洲海鲈进化关系最近,两者氨基酸同源性高达80.7%.健康花鲈Wap65-2基因mRNA主要在肝中表达,心和肌肉中少量表达.qRT-PCR分析揭示,哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染感染12 h后,花鲈肝中Wap65-2基因mRNA表达显著上调,24 h时达到峰值,为健康对照的6.89倍.原核表达花鲈Wap65-2并制备抗血清.Western blot分析表明,哈维氏弧菌感染12 h后,花鲈血清中Wap65-2含量显著增加,36 h时达到最大值,为健康对照的5.33倍.综上所述,花鲈Wap65-2基因的表达与其细菌感染性免疫应激紧密相关.