目的 探讨survivin反义RNA/HSP70双基阂转染对乳腺癌细胞系MCF-7的影响.方法 将已成功获得的双基因载体(pIRES2-EGFP-survivin反义RNA/HSP70)用脂质体介导转染乳腺癌细胞系MCF-7,转染72 h,收集各组细胞,用倒置荧光显微镜观察并证实转染是否成功;采用real-time PCR方法检测细胞内survivin基因mRNA水平的表达变化;用Western blotting检测细胞HSP70蛋白表达变化;应用Annexin-V-cy5/7AAD双染后流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 转染双基因载体与转染空载体的乳腺癌细胞系MCF-7于倒置荧光显微镜下可见绿色荧光;将转染双基因载体的MCF-7细胞与转染空载体的MCF-7细胞和未转染的MCF-7细胞相比,survivin mRNA表达水平降低,并有效诱导细胞发生凋亡,而HSP70蛋白表达升高.结论 Survivin反义RNA与HSP70双基因转染成功;survivin反义RNA能干扰MCF-7内源survivin的表达,诱导细胞凋亡;HSP70能上调MCF-7细胞HSP70蛋白的表达.
作者：龚道元；郭婷婷；伏红霞；彭艳；王晓娟
来源：南方医科大学学报 2010 年 30卷 7期
