目的 评价人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)经添加B27的无血清培养基诱导后向神经元样细胞分化的能力和效率.方法 将第4代HUCMSCs分为4组:A组:血清培养基(SCM)处理14 d;B组:给予SCM+20 ng/mL神经生长因子(NGF)+10 ng/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)治疗14 d;C组:无血清培养基(SFM)处理14 d;D组:SFM+20 ng/mL NGF+10 ng/mL bFGF处理.每3 d更换各组细胞培养液.倒置显微镜观察神经球生长情况,流式细胞术分析细胞标记物.巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、人重肽神经丝蛋白(NEFH)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)通过qRT-PCR和Western blotting进行定量.结果 在诱导前,HUCMSCs表现出丰富的间充质干细胞表面标志物(CD29、CD44和CD105分别为99.5％、49.6％和77.7％)的表达.在第7、10、14天观察神经元样细胞的形成,D组最优,其次是C、B、A组.qRT-PCR和Western blotting结果显示,A、B、C、D组Nestin和GFAP表达逐渐减少,NEFH和NSE表达逐渐增加,A组与其他3组的GFAP、NEFH、Nestin和NSE表达差异有统计学意义(P<0.05).结论 添加B27的SFM可以有效地将HUMSCs分化为神经元样细胞,添加细胞因子(NGF和bFGF)使分化效果更显著.
作者：李云逸；杨锦培；傅国；周攀；刘阳；李志忠；焦根龙
来源：南方医科大学学报 2020 年 40卷 9期
