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目的:探讨Toll样受体(TLRs)在高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)诱导严重烧伤后枯否细胞(KCs)产生促炎性细胞因子TNF-α和IL-1 β中的作用.方法:32只健康成年雄性SD大鼠随机分为两组.烫伤组大鼠采用背部置于98℃水中12 s的方法制成30%TBSA Ⅲ度烧伤模型并立即行液体复苏,假烫组以室温水替代98℃热水且不予液体复苏.伤后24 h,分离出肝脏KCs,分别以0、50、100、200 ng/ml HMGB1刺激48 h,ELISA法检测上清液中TNF-α和IL-1β含量.另将烫伤大鼠肝脏KCs随机分为对照组(正常培养48 h)、HMGB1组(100 ng/ml HMGB1刺激48 h)、HMGB 1+ TLR2/TLR4抗体组(以20 μ g/ml TLR2抗体或TLR4抗体培养2h后加入100ng/ml HMGB1刺激48 h),ELISA法检测培养上清液中TNF-α和IL-1β含量,Northern blot法检测各组KCs中TNF-α和IL-1β mRNA的表达.结果:不同浓度HMGB1刺激严重烧伤及假烫大鼠KCs后,上清液中TNF-α和IL-1β含量呈剂量依赖性升高,且烧伤组水平明显高于假烫组(P<0.05或P<0.01);同时,KCs中TNF-α和IL-1β mRNA表达也显著升高.TLR2抗体和TLR4抗体均明显抑制HMGB1诱导的KCs产生TNF-α和IL-1β水平的升高,且TLR2抗体对HMGB1诱导的IL-1β升高的抑制作用强于TLR4抗体,而TLR4抗体对HMGB1诱导的TNF-α升高的抑制作用强于抗TLR2抗体.结论:

作者:陈旭林;孙立;郭峰;王飞;刘晟;梁勋;王仁素;王永杰;孙业祥

来源:感染、炎症、修复 2015 年 16卷 2期

知识库介绍

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作者:
陈旭林;孙立;郭峰;王飞;刘晟;梁勋;王仁素;王永杰;孙业祥
来源:
感染、炎症、修复 2015 年 16卷 2期
标签:
高迁移率族蛋白B1 烧伤 枯否细胞 Toll样受体 促炎性细胞因子 High mobility group box protein 1 Burns Kupffer cell Toll-like receptor Proinflammatory cytokine
目的:探讨Toll样受体(TLRs)在高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)诱导严重烧伤后枯否细胞(KCs)产生促炎性细胞因子TNF-α和IL-1 β中的作用.方法:32只健康成年雄性SD大鼠随机分为两组.烫伤组大鼠采用背部置于98℃水中12 s的方法制成30%TBSA Ⅲ度烧伤模型并立即行液体复苏,假烫组以室温水替代98℃热水且不予液体复苏.伤后24 h,分离出肝脏KCs,分别以0、50、100、200 ng/ml HMGB1刺激48 h,ELISA法检测上清液中TNF-α和IL-1β含量.另将烫伤大鼠肝脏KCs随机分为对照组(正常培养48 h)、HMGB1组(100 ng/ml HMGB1刺激48 h)、HMGB 1+ TLR2/TLR4抗体组(以20 μ g/ml TLR2抗体或TLR4抗体培养2h后加入100ng/ml HMGB1刺激48 h),ELISA法检测培养上清液中TNF-α和IL-1β含量,Northern blot法检测各组KCs中TNF-α和IL-1β mRNA的表达.结果:不同浓度HMGB1刺激严重烧伤及假烫大鼠KCs后,上清液中TNF-α和IL-1β含量呈剂量依赖性升高,且烧伤组水平明显高于假烫组(P<0.05或P<0.01);同时,KCs中TNF-α和IL-1β mRNA表达也显著升高.TLR2抗体和TLR4抗体均明显抑制HMGB1诱导的KCs产生TNF-α和IL-1β水平的升高,且TLR2抗体对HMGB1诱导的IL-1β升高的抑制作用强于TLR4抗体,而TLR4抗体对HMGB1诱导的TNF-α升高的抑制作用强于抗TLR2抗体.结论: