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目的 探讨hsa_circ_0006370在高糖诱导的肾小管上皮细胞铁死亡中的作用.方法 培养人近曲小管上皮细胞HK-2,RT-qPCR检测高糖和爱拉斯汀(Erastin)处理对HK-2细胞中hsa_circ_0006370表达的影响.在HK-2细胞中干扰hsa_circ_0006370表达,将实验分为4组:高糖+si-NC、高糖+si-hsa_circ_0006370、Erastin+si-NC和Erastin+si-hsa_circ_0006370,RT-qPCR检测各组细胞中hsa_circ_0006370的表达水平;MTS实验检测各组细胞的增殖水平;相对应试剂盒分别检测各组细胞内铁离子、活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;Western blot检测各组细胞中的GPX4、xCT、FT、TFR、NRF2、HO-1蛋白表达水平.结果 和正常培养组相比,高糖培养组和Erastin培养组细胞中hsa_circ_0006370表达水平显著升高(P均<0.01).与高糖+si-NC组相比,高糖+si-hsa_circ_0006370组细胞中hsa_circ_0006370相对表达水平显著降低(P<0.01),细胞的增殖能力显著增强(P<0.01),细胞内铁离子、ROS、LDH和MDA活性水平均显著降低,而GSH-Px水平明显增加(P均<0.01),细胞中的GPX4、xCT、FT、NRF2和HO-1蛋白表达水平显著升高,而TFR蛋白表达水平显著降低;与Erastin+si-NC组相比,Erastin+si-hsa_circ_0006370组细胞中hsa_circ_0006370相对

作者:熊轩;严跃红;杨倩;沈美妊;钟小仕

来源:广东药科大学学报 2022 年 38卷 1期

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作者:
熊轩;严跃红;杨倩;沈美妊;钟小仕
来源:
广东药科大学学报 2022 年 38卷 1期
标签:
糖尿病肾病;hsa_circ_0006370;肾小管上皮细胞;铁死亡
目的 探讨hsa_circ_0006370在高糖诱导的肾小管上皮细胞铁死亡中的作用.方法 培养人近曲小管上皮细胞HK-2,RT-qPCR检测高糖和爱拉斯汀(Erastin)处理对HK-2细胞中hsa_circ_0006370表达的影响.在HK-2细胞中干扰hsa_circ_0006370表达,将实验分为4组:高糖+si-NC、高糖+si-hsa_circ_0006370、Erastin+si-NC和Erastin+si-hsa_circ_0006370,RT-qPCR检测各组细胞中hsa_circ_0006370的表达水平;MTS实验检测各组细胞的增殖水平;相对应试剂盒分别检测各组细胞内铁离子、活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;Western blot检测各组细胞中的GPX4、xCT、FT、TFR、NRF2、HO-1蛋白表达水平.结果 和正常培养组相比,高糖培养组和Erastin培养组细胞中hsa_circ_0006370表达水平显著升高(P均<0.01).与高糖+si-NC组相比,高糖+si-hsa_circ_0006370组细胞中hsa_circ_0006370相对表达水平显著降低(P<0.01),细胞的增殖能力显著增强(P<0.01),细胞内铁离子、ROS、LDH和MDA活性水平均显著降低,而GSH-Px水平明显增加(P均<0.01),细胞中的GPX4、xCT、FT、NRF2和HO-1蛋白表达水平显著升高,而TFR蛋白表达水平显著降低;与Erastin+si-NC组相比,Erastin+si-hsa_circ_0006370组细胞中hsa_circ_0006370相对