目的 鉴定翼状胬肉和正常结膜组织中microRNA-122(miR-122)的作用,研究miR-122在翼状胬肉发病机制中的潜在功能.方法 通过RT-PCR定量实验,检测miR-122在翼状胬肉中表达情况.检测翼状胬肉和正常结膜组织中miR-122预测靶点CREB1的表达及其与miR-122的相关性.分离培养翼状胬肉上皮细胞,分别转染miR-122 mimic或miR-122 inhibitor来改变miR-122的表达水平.通过荧光素酶活性测定、定量RT-PCR和Western印迹检测miR-122对CREB1的调节,及下游的p53、p21的表达.通过AO/EB染色和caspase活性测定研究miR-122对培养的翼状胬肉上皮细胞凋亡的影响.结果 发现CREB1的表达和miR-122呈负相关,并且CREB1的表达在翼状胬肉中显著增加,尤其是在上皮的浅层中(P =0.031).翼状胬肉上皮细胞中,miR-122可特异性结合CREB13'UTR并负向调节CREBJ表达(P=0.033).过表达miR-122可降低翼状胬肉上皮细胞的凋亡和caspase活性,同时能够使p53、p21的表达上调(P=0.028,0.029).结论 翼状胬肉中miR-122低表达可能通过调节CREB1表达进而影响P53/P21信号通路导致细胞凋亡异常,从而促进翼状胬肉生长.
作者:房春来;马宁;孟兆军;弥树勇;丁旭晨
来源:国际遗传学杂志 2019 年 42卷 6期