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目的 探讨敲低蛋白酶激活受体2(PAR2)基因对缺氧/复氧(H/R)损伤后H9c2心肌细胞氧化应激的影响.方法 将H9 c2心肌细胞分为非特异性干扰组(NS组)和特异性干扰组(SI组),分别转染非特异小干扰RNA(siRNA)和PAR2 siRNA.转染48 h后检测两组PAR2 mRNA表达情况以评价PAR2敲除效率.取成功转染siRNA的H9 c2细胞,建立H/R模型,采用化学比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,黄嘌呤氧化酶法测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活力,硫代巴比妥酸显色法测定细胞丙二醛的含量.结果 转染48 h后,SI组PAR2 mRNA表达水平低于NS组(P<0.05),且降至NS组30%以下.SI组ROS相对荧光强度、丙二醛及LDH含量均低于NS组(均P<0.05),SOD活力高于NS组(均P<0.05).结论 PAR2基因敲低可减轻损伤后H9c2心肌细胞的氧化应激,从而发挥心肌保护作用.

作者:王敏;张珊;慕家盛;王媛媛;杨青男;黄泽旭;陈启稚

来源:广西医学 2019 年 41卷 7期

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作者:
王敏;张珊;慕家盛;王媛媛;杨青男;黄泽旭;陈启稚
来源:
广西医学 2019 年 41卷 7期
标签:
蛋白酶激活受体2基因 氧化应激 缺氧/复氧损伤 H9c2心肌细胞 敲低 转染
目的 探讨敲低蛋白酶激活受体2(PAR2)基因对缺氧/复氧(H/R)损伤后H9c2心肌细胞氧化应激的影响.方法 将H9 c2心肌细胞分为非特异性干扰组(NS组)和特异性干扰组(SI组),分别转染非特异小干扰RNA(siRNA)和PAR2 siRNA.转染48 h后检测两组PAR2 mRNA表达情况以评价PAR2敲除效率.取成功转染siRNA的H9 c2细胞,建立H/R模型,采用化学比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,黄嘌呤氧化酶法测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活力,硫代巴比妥酸显色法测定细胞丙二醛的含量.结果 转染48 h后,SI组PAR2 mRNA表达水平低于NS组(P<0.05),且降至NS组30%以下.SI组ROS相对荧光强度、丙二醛及LDH含量均低于NS组(均P<0.05),SOD活力高于NS组(均P<0.05).结论 PAR2基因敲低可减轻损伤后H9c2心肌细胞的氧化应激,从而发挥心肌保护作用.