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目的 探讨炎性因子TNF-α、IL-1β和IFN-γ预处理脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,AD-MSCs)是否可以改变其分泌组的生物学特性并分析其对人骨性关节炎软骨细胞的表型产生影响.方法 获取并培养AD-MSCs和人骨性关节炎软骨细胞,分别使用工作浓度为10 ng/mL的TNF-α、IL-1β、IFN-γ的条件培养液和对照培养液(DMEM-F12+2%FBS)预处理AD-MSCs并收集对应的条件培养基(CM-1组、CM-2组、CM-3组和CM-0组),各组分别培养骨性关节炎软骨细胞72 h后,通过免疫荧光染色、RT-PCR和Western Blot法检测软骨细胞SOX-9、COL2、RUNX2、MMP13的表达情况,所有细胞实验均重复3次,比较4组SOX9、COL2、MMP13、RUNX2表达水平.结果 CM-1组、CM-2组、CM-3组AD-MSCs较CM-0组细胞明显变得扁平、粗大.CM-1组、CM-2组、CM-3组SOX9、COL2的表达水平较CM-0组高,MMP13表达水平较CM-0组低,差异有统计学意义(P<0.05).在基因水平上4组RUNX2的表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 采用炎性因子预处理MSCs,形成的条件培养基可以明显增强骨性关节炎软骨细胞的成软骨能力,并降低骨性关节炎软骨细胞的肥大化和降解代谢水平.

作者:李明洋;杨君君;龚啸元;宋雄波;黄术;刘政;伍锦辉;刘宝荣

来源:中国骨与关节损伤杂志 2022 年 37卷 3期

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作者:
李明洋;杨君君;龚啸元;宋雄波;黄术;刘政;伍锦辉;刘宝荣
来源:
中国骨与关节损伤杂志 2022 年 37卷 3期
标签:
脂肪间充质干细胞;炎性因子;骨性关节炎软骨细胞;旁分泌;软骨再生
目的 探讨炎性因子TNF-α、IL-1β和IFN-γ预处理脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,AD-MSCs)是否可以改变其分泌组的生物学特性并分析其对人骨性关节炎软骨细胞的表型产生影响.方法 获取并培养AD-MSCs和人骨性关节炎软骨细胞,分别使用工作浓度为10 ng/mL的TNF-α、IL-1β、IFN-γ的条件培养液和对照培养液(DMEM-F12+2%FBS)预处理AD-MSCs并收集对应的条件培养基(CM-1组、CM-2组、CM-3组和CM-0组),各组分别培养骨性关节炎软骨细胞72 h后,通过免疫荧光染色、RT-PCR和Western Blot法检测软骨细胞SOX-9、COL2、RUNX2、MMP13的表达情况,所有细胞实验均重复3次,比较4组SOX9、COL2、MMP13、RUNX2表达水平.结果 CM-1组、CM-2组、CM-3组AD-MSCs较CM-0组细胞明显变得扁平、粗大.CM-1组、CM-2组、CM-3组SOX9、COL2的表达水平较CM-0组高,MMP13表达水平较CM-0组低,差异有统计学意义(P<0.05).在基因水平上4组RUNX2的表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 采用炎性因子预处理MSCs,形成的条件培养基可以明显增强骨性关节炎软骨细胞的成软骨能力,并降低骨性关节炎软骨细胞的肥大化和降解代谢水平.