目的 观察青光安颗粒剂含药血清对视网膜神经节细胞-5(retinal ganglion cells-5,RGC-5)损伤模型中线粒体自噬和相关蛋白的影响.方法 将14只大鼠随机分为空白对照组(3只)和青光安组(11只).青光安组灌胃青光安颗粒剂,空白对照组灌胃同等剂量的生理盐水,1次/d,灌胃7 d,第7天灌胃后提取含药血清和空白血清.培养RGC-5细胞,用谷氨酸毒性模拟青光眼所造成的神经细胞损伤,CCK8法筛选合适的含药血清和谷氨酸浓度.细胞分组为正常细胞组、空白血清组(谷氨酸+空白血清)、含药血清组(谷氨酸+含药血清)、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)+空白血清组(谷氨酸+3-MA+空白血清)、3-MA+含药血清组(谷氨酸+3-MA+含药血清组).细胞培养24 h后,荧光共定位检测线粒体自噬发生情况;Western blot检测微管相关蛋白轻链3(microtubule associated protein light chain 3,LC3)中LC3-Ⅱ/LC3-I、溶酶体相关膜蛋白1(lysosome associated membrane pro-tein1,LAMP1)蛋白的表达.结果 通过CCK8结果筛选,确定谷氨酸最佳的作用浓度为20 mmol/L,空白血清和含药血清的作用浓度均为20％.与空白血清组相比,含药血清组、3-MA+空白血清组和3-MA+含药血清组的溶酶体含量显著降低(P<0.05).与空白血清组相比,含药血清组、3-MA+空白血清组和3-MA+含药

作者：刘倩宏；陈立浩；时健；朱冰瑶；曾令聪；姚小磊

来源：湖南中医药大学学报 2021 年 41卷 10期