目的:通过体外实验探讨沉默巢蛋白( Nestin)基因对人食管癌ECA109细胞增殖能力的影响及可能机制。方法合成Lenti-Nestin慢病毒载体,实验设blank组、scrambled组和Lent-Nestin组,转染ECA109细胞,建立稳定沉默Nestin基因的细胞系Lenti-Nestin;用qRT-PCR和Western blot检测Nestin、c-myc和cyclin D1 mRNA和蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;平板集落实验检测细胞的集落形成。结果稳定沉默Nestin的细胞系构建成功;与blank组和scrambled组相比,Lent-Nestin组中Nestin mRNA( P<0.01)和蛋白( P<0.05)水平明显降低;细胞增殖能力明显降低( P<0.01),集落形成能力显著下降( P<0.05);沉默Nestin表达后,c-myc、cyclin D1表达明显受到抑制( P<0.05)。结论沉默Nestin基因表达可抑制人食管癌ECA109细胞的增殖能力,其可能通过调控c-myc、cyclin D1表达参与其中。
作者:曹燕妮;王华川;王聪懿;朱深银;温剑虎
来源:基础医学与临床 2015 年 9期