目的 探讨蛋白酶体抑制剂Oprozomib(OZ)对顺铂(DDP)耐药卵巢癌细胞的作用,并初步揭示其机制.方法 体外培养DDP耐药卵巢癌细胞SKOV3/DDP、A2780/DDP,传代后选取对数生长期细胞进行实验.研究OZ对耐药卵巢癌细胞活力的影响时,OZ浓度设为0、3、9、27、81、243、729、2181、6561 nmol/L,与细胞共培养;研究DDP对耐药卵巢癌细胞活力的影响时,DDP浓度设为0、3、9、27、81、243、729、2181、6561 nmol/L,另加入125 nmol/L OZ,采用CCK-8法检测细胞活力;采用流式细胞术检测DDP+OZ联用时的细胞凋亡情况.将实验分为对照组和OZ组,检测OZ对蛋白酶体糜蛋白酶(CT-L)活性和谷胱甘肽(GSH)合成的影响;采用Western blotting检测胞内谷胱甘肽合成酶(GSS)蛋白的表达.将实验分为对照组、DDP组、OZ组、DDP+OZ、DDP+OZ+GSH组和DDP+OZ+Tempol组,检测胞内活性氧簇(ROS)水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 OZ对SKOV3/DDP、A2780/DDP细胞的IC50分别为140、350 nmol/L;与OZ联用时,DDP在两株细胞中的IC50分别为154、232 nmol/L.DDP+OZ联用时,两株细胞凋亡率均明显升高(P<0.01).OZ可抑制蛋白酶体CT-L活性,并呈剂量依赖性.OZ可抑制胞内GSH合成及GSS蛋白表达(P<0.01),GSH水平降低导致ROS清除受阻,ROS清除剂Tempol可明显降低胞内ROS水

作者：任方芳；赵太强

来源：解放军医学杂志 2020 年 45卷 4期