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目的 探讨Ⅰ型干扰素受体1 (IFNAR1)对伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响.方法 以慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建猪肾上皮细胞(PK15)敲除IFNAR1基因的稳定细胞系.运用细胞活力检测、荧光观察、流式细胞术检测、滴度测定、Real-time PCR等技术进行IFNAR1功能验证.结果 随着PRV感染时间延长,敲除IFNAR1基因可以显著促进PRV-TK mRNA的转录,PRV-gE蛋白的翻译以及子代病毒的毒力.结论 IFNAR1在抑制PRV增殖中发挥重要作用.

作者:邵科宇;张爽;段利芳;马英先;郭玉堃;李佳佳;刘晓贺;杜永坤;褚贝贝

来源:解剖学报 2019 年 50卷 6期

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邵科宇;张爽;段利芳;马英先;郭玉堃;李佳佳;刘晓贺;杜永坤;褚贝贝
来源:
解剖学报 2019 年 50卷 6期
标签:
猪肾上皮细胞 Ⅰ型干扰素受体1 伪狂犬病病毒 基因编辑 免疫印迹法 实时定量聚合酶链反应 猪
目的 探讨Ⅰ型干扰素受体1 (IFNAR1)对伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响.方法 以慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建猪肾上皮细胞(PK15)敲除IFNAR1基因的稳定细胞系.运用细胞活力检测、荧光观察、流式细胞术检测、滴度测定、Real-time PCR等技术进行IFNAR1功能验证.结果 随着PRV感染时间延长,敲除IFNAR1基因可以显著促进PRV-TK mRNA的转录,PRV-gE蛋白的翻译以及子代病毒的毒力.结论 IFNAR1在抑制PRV增殖中发挥重要作用.