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目的 探讨自噬对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)凋亡的影响.方法 构建24只雄性SD大鼠心肌梗死模型并培养CMECs后,随机均分为三组:QX组为模型对照,QX+雷帕霉素(RAPA)组培养液中加入RAPA,QX+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组培养液中加入3-MA处理;另设空白对照组(ZC组,8只).电镜下观察各组细胞自噬体形成情况,Western blot分析微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ比值,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 与ZC组相比,QX组有自噬体形成,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高,细胞总凋亡率增加(P<0.05);与QX组相比,QX+RAPA组自噬体数目增多,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高,细胞总凋亡率减少(P<0.05);与QX组相比,QX+3-MA组自噬体数目减少,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低,细胞总凋亡率增加(P<0.05).结论 缺血CMECs会发生自噬,细胞凋亡增加;RAPA能够增强缺血CMECs自噬,减少凋亡;3-MA抑制缺血CMECs自噬,进一步增加凋亡.

作者:马培泽;杨春;杨雯晴;姜月华;汲广成

来源:江苏医药 2017 年 43卷 8期

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作者:
马培泽;杨春;杨雯晴;姜月华;汲广成
来源:
江苏医药 2017 年 43卷 8期
标签:
心肌微血管内皮细胞 自噬 细胞凋亡 Myocardial microvascular endothelial cell Autophagy Cell apoptosis
目的 探讨自噬对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)凋亡的影响.方法 构建24只雄性SD大鼠心肌梗死模型并培养CMECs后,随机均分为三组:QX组为模型对照,QX+雷帕霉素(RAPA)组培养液中加入RAPA,QX+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组培养液中加入3-MA处理;另设空白对照组(ZC组,8只).电镜下观察各组细胞自噬体形成情况,Western blot分析微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ比值,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 与ZC组相比,QX组有自噬体形成,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高,细胞总凋亡率增加(P<0.05);与QX组相比,QX+RAPA组自噬体数目增多,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高,细胞总凋亡率减少(P<0.05);与QX组相比,QX+3-MA组自噬体数目减少,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值降低,细胞总凋亡率增加(P<0.05).结论 缺血CMECs会发生自噬,细胞凋亡增加;RAPA能够增强缺血CMECs自噬,减少凋亡;3-MA抑制缺血CMECs自噬,进一步增加凋亡.