目的 探讨乌司他丁对脓毒症中miR-21/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路影响.方法 将SPF级BALB/c小鼠(30只)随机(随机数字法)分为3组(每组n=10):脓毒症组(LPS组,LPS 10 mg/kg一次性腹腔内注射),乌司他丁预处理组(UTI组,乌司他丁105 U/kg腹腔注射预处理2 h后给予LPS 10 mg/kg腹腔内注射),正常组(相同时间点注射等体积生理盐水).24 h后处死小鼠观测肺组织病理学结果,采用荧光实时定量PCR法测定肺组织中miR-21表达,免疫组化法检测各组肺部组织中PTEN,p-p38MAPK的表达.另外,小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞采用LipofectamineTM 2000转染试剂以及miR-21模拟剂(100 nmol/L)、抑制剂(100 nmol/L)处理6 h后,弃掉上清液,加入乌司他丁(1000 U/mL)处理2 h后加入LPS(500 ng/mL)刺激,培养24 h后收集细胞,应用PCR法测定肺组织中miR-21表达,Western-blot法分别检测PTEN、p-p38MAPK蛋白表达情况.结果 动物实验中,与正常组(1.00±0.00)比较,LPS组中miR-21(2.73±0.17)及p-p38MAPK表达上调,miR-21下游靶基因PTEN蛋白表达下调,而与LPS组比较,UTI组miR-21(2.14±0.13)及p-p38MAPK表达水平下降,PTEN蛋白表达上调(P<0.05).细胞实验中,与LPS组(1.93±0.21)比较,LPS+miR-21抑制剂组p-p38MAPK蛋白表达量(1.51±0.06)下降,而LPS+miR
作者:陶杨;肖玲;黄健;马渝
来源:中华急诊医学杂志 2018 年 27卷 11期