目的:结合多重聚合酶链式反应(PCR)和荧光探针溶解曲线单核苷酸多态性(SNP)分型技术,建立一种方便准确的 HPA 等位基因分型方法。方法针对 HPA 1~5,15这6种常见的 HPA 亚型等位基因设计多重 PCR 引物及SNP 探针,通过多重 PCR 同时扩增6个等位基因目标片段并利用荧光探针的溶解温度变化区分不同 SNP 位点。结果多重 PCR 可同时扩增6个等位基因的目标片段,并通过溶解峰的 Tm 值变化区分 SNP 位点,结果与 PCR - SSP 位点相比较有相同的准确度,且操作更为简便,无需 PCR 后续电泳步骤,减少污染风险。结论成功建立了一种结合多重 PCR和荧光探针溶解曲线分析技术的 HPA 1~5,15等位基因检测方法。
作者:张肄鹏;黄志平;聂冬梅;郑望春;刘卫东
来源:临床和实验医学杂志 2016 年 15卷 15期