目的 获得表面展示有16 kD抗原多肽(16kD91-110)的PP7噬菌体样颗粒(bacteriophage-like particle,BLPs),并评价其在结核病诊断中的价值.方法 用普通PCR技术扩增出含16kD91-110多肽编码基因的PP7衣壳蛋白基因,将其插入到pETDuet-2PP7载体中,获得pETDuet-2PP7-16kD91-110质粒;将上述重组质粒转化大肠埃希菌,诱导表达产物用SDS-PAGE和westem blot进行鉴定;将纯化的2PP7-16kD91-110作为刺激抗原,用ELISA间接法检测结核病患者血清中的16 kD抗体水平.结果 SDS-PAGE及电镜结果显示成功表达2PP7-16kD91-110 BLPs,并且展示于PP7 BLPs表面的16kD91-110多肽表位能特异性与抗16 kD抗体结合;对活动性肺结核和潜伏性肺结核患者,以2PP7-16kD91-110 BLPs为刺激抗原的全血释放γ干扰素试验的敏感性分别为75％和82.9％,与北京万泰结核分枝杆菌相关γ干扰素释放试剂盒相比,差异无统计学意义.结论 成功制备表面展示有16kD91-110多肽的PP7 BLPs,为应用γ干扰素释放试验检测结核分枝杆菌提供了一种安全性高、稳定性好、价格低廉的刺激抗原,为结核病的诊断提供一种新的思路.
作者：伊正君；孙艳花；赵荣兰；路晓红；李纾；李猛；孙艳丽
来源：临床检验杂志 2018 年 36卷 1期
