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目的 分析盐霉素对CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其影响机制.方法 通过有血清和无血清培养技术培养人乳腺癌MCF-7细胞株,收集两种细胞,对其CD24、CD44标志物进行荧光染色,采用流式细胞仪检测CD44 +/CD24-/low亚群细胞的比例;盐霉素培养MCF-7细胞株和CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞,MTT法筛选出引起CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞细胞凋亡低于IC50的浓度;Transwell技术检测MCF-7和CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞的迁移和侵袭能力,以筛选出的浓度诱导CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞,以排除盐霉素对该细胞增殖抑制作用的影响,Transwell技术检测该细胞迁移和侵袭能力的变化;Western blot技术检测TGFβ1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、MMP-2、MMP-9蛋白水平的变化.结果 CD44+/CD24-/low表型乳腺癌干细胞在无血清培养和有血清培养中的比例分别为(86.93±0.53)%和(19.98±0.62)%(P<0.01),CD44 +/CD24+表型细胞的比例分别是(12.68±0.59)%和(79.90±0.57)% (P<O.01);MTT法筛选出低于IC50的浓度是1、3、5、7μmol/L;Transwell技术检测CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力明显高于MCF-7细胞株,并随盐霉素浓度的上升呈下降趋势(P<0.05).West

作者:尹燕雪;李传伟;于爱莲;李玲玉;曹露;王学春

来源:临床与实验病理学杂志 2016 年 32卷 3期

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作者:
尹燕雪;李传伟;于爱莲;李玲玉;曹露;王学春
来源:
临床与实验病理学杂志 2016 年 32卷 3期
标签:
乳腺肿瘤 乳腺癌干细胞 CD44+/CD24-/low表型干细胞 盐霉素 迁移能力 侵袭能力 breast neoplasm breast cancer stem cell CD44 +/CD24-/low phenotype cell salinomycin migration invasion
目的 分析盐霉素对CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其影响机制.方法 通过有血清和无血清培养技术培养人乳腺癌MCF-7细胞株,收集两种细胞,对其CD24、CD44标志物进行荧光染色,采用流式细胞仪检测CD44 +/CD24-/low亚群细胞的比例;盐霉素培养MCF-7细胞株和CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞,MTT法筛选出引起CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞细胞凋亡低于IC50的浓度;Transwell技术检测MCF-7和CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞的迁移和侵袭能力,以筛选出的浓度诱导CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞,以排除盐霉素对该细胞增殖抑制作用的影响,Transwell技术检测该细胞迁移和侵袭能力的变化;Western blot技术检测TGFβ1、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、MMP-2、MMP-9蛋白水平的变化.结果 CD44+/CD24-/low表型乳腺癌干细胞在无血清培养和有血清培养中的比例分别为(86.93±0.53)%和(19.98±0.62)%(P<0.01),CD44 +/CD24+表型细胞的比例分别是(12.68±0.59)%和(79.90±0.57)% (P<O.01);MTT法筛选出低于IC50的浓度是1、3、5、7μmol/L;Transwell技术检测CD44 +/CD24-/low表型乳腺癌干细胞迁移和侵袭能力明显高于MCF-7细胞株,并随盐霉素浓度的上升呈下降趋势(P<0.05).West