目的 重组表达结核分枝杆菌保护性肽表位KLIANNTRV二聚体、四聚体、八聚体,以进一步探讨其免疫效应.方法 选取结核分枝杆菌抗原表位KLIANNTRV,引入Th表位PADRE及木马肽序列(RKKRRQRRR),并以RVKR序列作为接头,分别合成结核分枝杆菌保护性肽表位KLIANNTRV二聚体、四聚体、八聚体全基因序列,经PCR扩增后分别插入融合表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转人大肠杆菌BI21并以IPTG诱导表达,进一步经GST亲合层析柱纯化,经SDS-PAGE和Westerm-blot鉴定重组表达蛋白.结果 成功构建了结核分枝杆菌保护性表位KLIANNTRV二聚体、四聚体、八聚体的表达质粒,并经IPTG诱导表达了大小约为20000、32000、54000的融合蛋白.结论 结核分枝杆菌保护性肽表位KLIANNTRV多聚体的重组表达为进一步开发结核疫苗提供有价值的依据.
作者:蒋天舒;周晔;吴传勇;陈燕;陈波;谷明莉;仲人前;邓安梅
来源:免疫学杂志 2008 年 24卷 2期