目的 探讨基于上皮间质转化(EMT)研究结肠癌转移相关基因1(MACC1)对结肠癌细胞HT-29增殖迁移和侵袭的作用机制.方法 人结肠癌HT-29细胞株购自中国科学院上海细胞研究所.转染shRNA敲降MACC1表达,RT-PCR和蛋白质印迹法筛选最佳敲降shRNA.根据随机对照法将细胞分为HT-29细胞对照组(HT-29组)、HT-29细胞转染shRNA-2组和HT-29细胞空白转染组.MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测EMT标志物(E-cadherin和Vimentin)的mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光法标记细胞骨架中的肌动蛋白和微管蛋白表达.结果 当转染shRNA-2的干扰质粒后,MACC1基因的表达水平为0.31±0.08,与 HT-29组(1.02±0.06)相比差异有统计学意义,F=46.43,P＜0.01.与 HT-29组的(0.02±0.04)％相比,转染 shRNA-2后细胞在24、36、48、60和72 h 时增殖率分别被抑制(11.00±1.06)％、(28.33±3.79)％、(37.00±4.17)％、(41.33±4.04)％和(43.33±5.03)％,差异有统计学意义,F=27.52,P＜0.01.Trans well细胞迁移和侵袭实验表明,与HT-29组(1.05±0.05,1.02±0.06)相比,转染shRNA-2后细胞迁移和侵袭数比率分别为0.41±0.03和0.24±0.04,差异有统计学意义,F值分别为56.01和110.82,均P＜0.01.敲降MACC1后,E-cadh

作者：赵为民；金博；于震；王海江

来源：中华肿瘤防治杂志 2021 年 28卷 14期