目的 观察苦参碱对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 取血管平滑肌细胞MOVAS进行培养,分别加入0.5、1、5、10、100μmol/L苦参碱溶液,作用24、48、72 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,根据增殖曲线进行回归计算,苦参碱对MOVAS细胞增殖抑制的EC50是7.6μmol/L,因此选择5、10μmol/L作用浓度进行后续实验.取对数生长期细胞,分为5μmol/L苦参碱组、10μmol/L苦参碱组及对照组,分别加入5、10μmol/L苦参碱和无菌PBS溶液.采用PI染色法检测各组细胞周期,ELISA法检测细胞凋亡率和凋亡相关蛋白Caspase-3活性,Western blotting法检测AKT/mTOR信号通路相关蛋白AKT、mTOR及其下游底物p70S6K、4EBP1磷酸化蛋白表达.结果 与对照组比较,5μmol/L苦参碱组、10μmol/L苦参碱组G1期细胞比例升高,S期和G2/M期细胞比例降低(P<0.05或<0.01);细胞凋亡率升高,Caspase-3活性增加(P<0.05或<0.01);p-AKT、p-mTOR及p-p70S6K、p-4EBP1蛋白表达均降低(P均<0.05);与5μmol/L苦参碱组比较,10μmol/L苦参碱组上述指标的改善更明显(P均<0.05).结论 苦参碱能诱导MOVAS细胞发生细胞凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制MOVAS细胞增殖;其机制可能是通过抑制AKT/mTOR通路活性发挥作用.
作者：李小丹；高婉琴；王京
来源：山东医药 2020 年 60卷 26期
