目的 观察微小RNA106a-5p(miR-106a-5p)通过靶向调控细胞外信号调节激酶2(ERK2)对胃癌细胞顺铂(DDP)耐药性的影响,并探讨其可能的分子机制.方法 建立胃癌细胞系MGC-803 DDP耐药细胞株MGC-803/DDP,采用RT-PCR法检测MGC-803及MGC-803/DDP中miR-106a-5p及ERK2的表达.在线生物信息学软件star?Base和Targetscan7.2预测miR-106a-5p与ERK2是否存在结合位点,采用荧光素酶报告实验进一步验证二者的靶向调控关系.将MGC-803/DDP分为mimic组(转染miR-106a-5p mimic)、ERK2组(转染pcDNA3.1-ERK2)、mimic+ERK2组(共转染miR-106a-5p mimic和pcDNA3.1-ERK2)、NC组(不转染),采用EdU染色实验观察各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测增殖凋亡相关蛋白(Cyclin D1、Caspase3)、上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)及耐药基因MDR1表达变化,MTT法检测细胞对DDP的耐药性.结果 MGC-803/DDP细胞中miR-106a-5p相对表达量低于MGC-803细胞,ERK2 mRNA相对表达量高于MGC-803细胞(P均<0.05).预测显示,miR-106a-5p与ERK2存在连续结合位点;荧光素酶报告实验结果显示,miR-106a-5p可靶向负调控ERK2.EdU阳性细胞数ERK2组>NC组>mimic+ERK2组>mimic组,细胞凋

作者：杨万荷；李家群；张东艳；王昌高；昝慧

来源：山东医药 2021 年 61卷 17期