目的 观察加入楝酰胺(Rocaglamide,Roc-A)培养的人肝癌细胞株HepG2凋亡情况,并探讨其可能作用机制.方法 ①加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞凋亡情况观察:取对数生长期HepG2细胞,分为5组,分别加入0(空白对照)、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时取各组细胞,采用YF488-Annexin V/PI荧光双染法观察细胞凋亡情况.②加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞已糖激酶Ⅱ(HK2)、抑凋亡因子类似物(BCL2L1)mRNA检测:取对数生长期HepG2细胞,分为2组,分别加入0、100 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用RT-qPCR法检测细胞HK2及BCL2L1 mRNA.③加入不同浓度Roc-A培养的HepG2细胞HK2、BCL2L1蛋白检测:取适量HepG2细胞,分为3组,分别加入0、100、200 nmol/L的Roc-A,培养24 h采用蛋白组学质谱分析法检测细胞HK2、BCL2L1蛋白.取对数生长期HepG2细胞分为5组,分别加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液,培养24 h时采用Western Blotting法检测HK2、BCL2L1蛋白.④癌组织HK2表达与肝癌患者的生存时间关系分析:采用Kaplan Meier Plotter癌症数据库分析癌组织HK2表达与肝癌患者生存时间的关系.结果 加入0、25、50、100、200 nmol/L的Roc-A溶液HepG2细胞凋亡率分别为0.83％ ±0.21％、9.46％ ±2.34％、24.68％ ±4.22％

作者：楚蕾蕾；高国伟；杨桢桢；杨留勤；武莉萍

来源：山东医药 2022 年 62卷 6期