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目的 探讨薯蓣皂苷对小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16-F10细胞)侵袭、迁移及黏附的抑制作用及机制.方法 常规培养B16-F10细胞,用CCK-8法检测不同浓度(20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μmol/L)薯蓣皂苷干预48 h后B16-F10细胞存活率,并筛选薯蓣皂苷的最佳实验浓度.将细胞随机分为空白对照组、薯蓣皂苷组、JAK2过表达组、薯蓣皂苷+JAK2过表达组,分别加入阴性对照病毒液、含5μmol/L薯蓣皂苷的DMEM培养基、过表达JAK2病毒液、过表达JAK2病毒液+5μmol/L薯蓣皂苷的DMEM培养基,继续培养24 h.用Transwell实验检测细胞侵袭能力,用划痕实验检测细胞迁移能力,用黏附实验检测细胞黏附情况,用Western blotting法检测细胞内上皮-间充质转化[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)]及Janus激酶(JAK2)/转录激活因子-3(STAT3)信号通路[JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)]相关蛋白表达.结果 经不同浓度薯蓣皂苷干预后B16-F10细胞存活率降低,根据薯蓣皂苷48 h半数抑制浓度选择5μmol/L作为后续实验浓度.与空白对照组比较,薯蓣皂苷组细胞迁移率、侵袭率、黏附数量均低(P均<0.05);E-cadherin表达高,N-cad-herin、Vimentin表达低(P均<0.05);p-JAK2、p-STAT3蛋白表达低(P均<

作者:许预;于新华;兰守夕;周姿含;董晓飞

来源:山东医药 2022 年 62卷 19期

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作者:
许预;于新华;兰守夕;周姿含;董晓飞
来源:
山东医药 2022 年 62卷 19期
标签:
黑色素瘤 薯蓣皂苷 细胞侵袭 细胞迁移 细胞黏附 JAK2/STAT3信号通路 上皮-间充质转化
目的 探讨薯蓣皂苷对小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16-F10细胞)侵袭、迁移及黏附的抑制作用及机制.方法 常规培养B16-F10细胞,用CCK-8法检测不同浓度(20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125μmol/L)薯蓣皂苷干预48 h后B16-F10细胞存活率,并筛选薯蓣皂苷的最佳实验浓度.将细胞随机分为空白对照组、薯蓣皂苷组、JAK2过表达组、薯蓣皂苷+JAK2过表达组,分别加入阴性对照病毒液、含5μmol/L薯蓣皂苷的DMEM培养基、过表达JAK2病毒液、过表达JAK2病毒液+5μmol/L薯蓣皂苷的DMEM培养基,继续培养24 h.用Transwell实验检测细胞侵袭能力,用划痕实验检测细胞迁移能力,用黏附实验检测细胞黏附情况,用Western blotting法检测细胞内上皮-间充质转化[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)]及Janus激酶(JAK2)/转录激活因子-3(STAT3)信号通路[JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)]相关蛋白表达.结果 经不同浓度薯蓣皂苷干预后B16-F10细胞存活率降低,根据薯蓣皂苷48 h半数抑制浓度选择5μmol/L作为后续实验浓度.与空白对照组比较,薯蓣皂苷组细胞迁移率、侵袭率、黏附数量均低(P均<0.05);E-cadherin表达高,N-cad-herin、Vimentin表达低(P均<0.05);p-JAK2、p-STAT3蛋白表达低(P均<