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目的 筛选K48聚泛素链在肿瘤坏死因子受体相关因子2(tumor necrosis factor receptor-associated factor 2,TRAF2)上的主要修饰位点.方法 比较不同物种间的TRAF2氨基酸序列,选出人TRAF2上保守率在90%以上的赖氨酸.构建人野生型TRAF2的表达载体及保守赖氨酸突变为精氨酸的突变表达载体.将不同的TRAF2表达载体与NF-κB荧光素酶报告基因表达载体共转至293FT细胞中,通过荧光素酶检测NF-κB激活情况.结果 人TRAF2上共有8个保守率在90%以上的赖氨酸,酶切及测序结果证明本研究成功构建TRAF2野生型和突变型表达载体.NF-κB荧光素酶报告基因检测证明TRAF2-K320可能是K48聚泛素链的主要修饰位点.结论 TRAF2-K320位点对TRAF2介导的NF-κB激活具有负向调控作用.

作者:白红妹;陈小平;陈正虎;杨建华

来源:同济大学学报(医学版) 2014 年 35卷 5期

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作者:
白红妹;陈小平;陈正虎;杨建华
来源:
同济大学学报(医学版) 2014 年 35卷 5期
标签:
肿瘤坏死因子受体相关因子2 K48聚泛素化 赖氨酸 NF-κB TRAF2 K48-polyubiquitination lysine NF-κB
目的 筛选K48聚泛素链在肿瘤坏死因子受体相关因子2(tumor necrosis factor receptor-associated factor 2,TRAF2)上的主要修饰位点.方法 比较不同物种间的TRAF2氨基酸序列,选出人TRAF2上保守率在90%以上的赖氨酸.构建人野生型TRAF2的表达载体及保守赖氨酸突变为精氨酸的突变表达载体.将不同的TRAF2表达载体与NF-κB荧光素酶报告基因表达载体共转至293FT细胞中,通过荧光素酶检测NF-κB激活情况.结果 人TRAF2上共有8个保守率在90%以上的赖氨酸,酶切及测序结果证明本研究成功构建TRAF2野生型和突变型表达载体.NF-κB荧光素酶报告基因检测证明TRAF2-K320可能是K48聚泛素链的主要修饰位点.结论 TRAF2-K320位点对TRAF2介导的NF-κB激活具有负向调控作用.