目的分别采用细胞计数法及中性红摄入法(NRU)检测幽门螺杆菌(Hp)空泡毒素活性,探讨NRU检测空泡毒素活性的应用价值.方法采用Hp液体培养上清浓缩液作为粗制VacA毒素,经倍比稀释(1∶160~1∶2)后与胃癌SGC-7901细胞共同孵育24 h.用细胞计数法及NRU同时评价VacA的空泡毒素活性,比较两种方法检测VacA空泡毒素活性的差异.结果经中性红染色后,胃癌细胞吸收大量染料,空泡更加明显.NRU对空泡毒素活性的判断结果与细胞计数法基本符合,细胞计数法显示1∶20~1∶2滴度样本均呈阳性结果,NRU于1∶20~1∶5滴度亦得到阳性结果,1∶2滴度组因细胞大量死亡得到"假阴性"结果(A550=0.06±0.04).1∶40滴度组细胞计数法判断为阴性,但NRU检测阳性(A550=0.12±0.04,P<0.05).结论 NRU检测空泡毒素活性具有简便、快速的特点,有助于对空泡毒素活性的定量评价,敏感性高于细胞计数法,可广泛用于空泡毒素活性的体外检测.
作者:苏暾;杜奕奇;李兆申;屠振兴;许国铭;龚燕芳
来源:上海医学 2003 年 26卷 2期