目的：构建结核分枝杆菌（MTB）融合基因2×esat-6原核表达载体，利用耻垢分枝杆菌诱导表达、纯化早期分泌抗原ESAT-6重组二聚体（rdESAT-6），Western blot分析其抗原性，并评估其在结核病患者中的血清学诊断价值。方法以DNA疫苗HG856A2为模板扩增2×esat-6基因，构建pMF41-2×esat-6原核表达载体，电转化耻垢分枝杆菌，诱导表达rdESAT-6蛋白，Western blot分析其抗原性。收集126例确诊的结核病患者和42名健康体检者的血清，用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）和结核斑点金免疫渗滤试验（TB-DOT）检测血清结核抗体，评估rdESAT-6在结核血清学诊断中的价值。结果成功构建了pMF41-2×esat-6重组质粒，以包涵体形式表达了rdESAT-6蛋白，纯化的蛋白纯度在95％以上，可与小鼠抗ESAT-6血清发生特异性反应。126例结核病患者血清检测结果表明，rdESAT-6蛋白在MTB 阳性组和阴性组患者血清学诊断的敏感性分别为79．75％（63/79）、61．70％（29/47），好于TB-DOT的62．03％（49/79）、44．68％（21/47）（P＜0．05）。2种方法对42名健康体检者血清诊断特异性均为95．24％（40/42）。结论 MTB的融合蛋白rdESAT-6用于结核病血清学检测具有较好的敏感性和特异性，可作为结核病血清学诊断的优选抗原。
作者：郭建；范齐文；范小勇；马辉；钱雪琴；胡香南；吴文娟
来源：检验医学 2014 年 6期
