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目的 探讨流式细胞术(FCM)检测结核分枝杆菌(MTB)利福平(RFP)异质性耐药的可行性.方法 将MTB临床分离株分别用12.5、25、50和100μg/mL RFP处理3、7和10 d后,用荧光素双醋酸酯(FDA)染色,采用FCM检测其平均荧光强度(MFI),计算敏感指数(实验管MFI/对照管MFI),并进行差异性分析.确定不影响RFP耐药MTB临床分离株生长、但抑制RFP敏感MTB临床分离株生长的RFP处理浓度和时间.将30株RFP敏感MTB临床分离株和30株RFP耐药MTB临床分离株菌液混合,得到RFP耐药MTB所占比例分别为0%、25%、50%、75%和100%的RFP异质性耐药MTB菌液,按照确定的RFP浓度和时间处理,计算FDA染色后的敏感指数.采用受试者工作特征(ROC)曲线评估不同比例RFP异质性耐药MTB菌液的敏感指数界值和检测性能.结果 基于FDA的FCM检测MTB RFP异质性耐药的较优RFP处理浓度为50μg/mL,作用时间为10 d;用50μg/mL RFP处理MTB 10 d时,基于FDA的FCM鉴别含0%、25%和100%的RFP异质性耐药MTB菌液样本的敏感指数界值分别为0.48和0.83,敏感性分别为96.2%和86.7%,特异性分别为96.7%和83.3%;处理14 d时,该方法鉴别含0%、25%和100%RFP异质性耐药MTB菌液样本的敏感指数界值分别为0.37和0.77,敏感性分别为96.7%和96.7%,特异性分别为93.3%和86.7%.结论 F

作者:李华;王伟亮;谢贝;杨瑜;孟繁荣;王楠;刘志辉;张言斌

来源:检验医学 2022 年 37卷 6期

知识库介绍

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作者:
李华;王伟亮;谢贝;杨瑜;孟繁荣;王楠;刘志辉;张言斌
来源:
检验医学 2022 年 37卷 6期
标签:
流式细胞术 结核分枝杆菌 利福平异质性耐药 荧光素双醋酸酯
目的 探讨流式细胞术(FCM)检测结核分枝杆菌(MTB)利福平(RFP)异质性耐药的可行性.方法 将MTB临床分离株分别用12.5、25、50和100μg/mL RFP处理3、7和10 d后,用荧光素双醋酸酯(FDA)染色,采用FCM检测其平均荧光强度(MFI),计算敏感指数(实验管MFI/对照管MFI),并进行差异性分析.确定不影响RFP耐药MTB临床分离株生长、但抑制RFP敏感MTB临床分离株生长的RFP处理浓度和时间.将30株RFP敏感MTB临床分离株和30株RFP耐药MTB临床分离株菌液混合,得到RFP耐药MTB所占比例分别为0%、25%、50%、75%和100%的RFP异质性耐药MTB菌液,按照确定的RFP浓度和时间处理,计算FDA染色后的敏感指数.采用受试者工作特征(ROC)曲线评估不同比例RFP异质性耐药MTB菌液的敏感指数界值和检测性能.结果 基于FDA的FCM检测MTB RFP异质性耐药的较优RFP处理浓度为50μg/mL,作用时间为10 d;用50μg/mL RFP处理MTB 10 d时,基于FDA的FCM鉴别含0%、25%和100%的RFP异质性耐药MTB菌液样本的敏感指数界值分别为0.48和0.83,敏感性分别为96.2%和86.7%,特异性分别为96.7%和83.3%;处理14 d时,该方法鉴别含0%、25%和100%RFP异质性耐药MTB菌液样本的敏感指数界值分别为0.37和0.77,敏感性分别为96.7%和96.7%,特异性分别为93.3%和86.7%.结论 F