目的 探讨MKKs/p38信号通路在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人巨噬细胞炎症反应中的作用.方法 分别以浓度为25,50,100μg/ml的ox-LDL刺激人THP-1巨噬细胞,并设立正常对照组.以p38 MAPK特异性抑制剂SB203580对人THP-1巨噬细胞内p38 MAPK进行抑制;分别用MKK3-siRNA及MKK6-siRNA使人巨噬细胞内MKK3及MKK6沉默,DCFH-DA免疫荧光测定细胞内活性氧簇(ROS)生成水平,总抗氧化力(TAC)评估细胞内抗氧化能力;ELISA法检测细胞培养上清液中白介素-18(IL-18)及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹法测定细胞内MKK3、MKK6以及p38 MAPK磷酸化水平,IL-18及TNF-α表达水平.结果 与正常对照相比,ox-LDL刺激THP-1细胞内ROS生成水平显著升高,TAC水平显著降低(P<0.05);细胞培养上清液及细胞内IL-18及TNF-α 水平显著升高(P<0.05);细胞内MKK3、MKK6以及p38 MAPK磷酸化水平显著上调(P<0.05).上述变化均具有ox-LDL浓度依赖性(P<0.05).与ox-LDL刺激后相比,SB203580处理显著抑制p38 MAPK磷酸化水平(P<0.05);与ox-LDL刺激后相比,特异性的小干扰RNA能够显著降低MKK3及MKK6的表达水平(P<0.05).SB203580及小干扰RNA处理能够显著降低ox-LDL诱导的IL-18及TNF-α表达(P<0.05),而对其诱导的ROS水平增高及TAC水平降低无明显影响(P>0.05).

作者：闵宁斌；张少华；刘仲伟；项羽

来源：山西医科大学学报 2019 年 50卷 10期