目的:研究爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)-miR-BART5-3p对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制.方法:体外培养人EBV阳性鼻咽癌细胞(C666-1)和人鼻咽癌细胞(CNE-2Z),将CNE-2Z组细胞设置为正常组,C666-1细胞随机分为对照组、EBV-miR-BART5-3p NC组、EBV-miR-BART5-3p mimics组和EBV-miR-BART5-3p inhibitor组.用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞及EBV阴性鼻咽癌患者和EBV阳性鼻咽癌患者癌组织中EBV-miR-BART5-3p表达情况,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活率,平板克隆实验评估各组放疗敏感性变化情况,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)法检测各组细胞凋亡敏感性变化,蛋白免疫印迹分析法检测转染后各组细胞p53、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸酶-3(caspase-3)和Bcl-2蛋白表达情况,双荧光素酶报告实验验证EBV-miR-BART5-3p与p53的靶向关系.结果:与EBV阴性组相比,EBV阳性组鼻咽癌组织中EBV-miR-BART5-3p表达水平显著升高(P<0.05).与正常组相比,对照组EBV-miR-BART5-3p表达、存活率、克隆数量和Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),凋亡率、p53、Bax和caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05).与对照组和EBV-miR-BART5-3p NC组相比,EBV-miR-BART5-3p mimics组EBV-miR-BART5-3p表达
作者:马庆华;马菲;李雪娟;赵孟阳
来源:现代肿瘤医学 2021 年 29卷 10期