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目的:研究腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)细胞SACC-83来源的外泌体(exosome,EXO)对人正常唾液腺间质成纤维细胞(human normal salivary gland stromal fibroblasts,hSGSFs)表达成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)的影响.方法:采用超滤管浓缩与EXO提取试剂盒相结合的方法从SACC-83的培养上清中提取EXO,通过透射电镜及Western Blot对所提取的EXO进行鉴定;将SACC-83来源的EXO用荧光染料PKH67标记后与hSGSFs共培养48 h,采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察hSGSFs对于SACC-83来源的EXO的摄取情况;利用qRT-PCR和Western Blot法检测在SACC-83来源的EXO作用下,hSGSFs中FAP的表达变化.结果:SACC-83培养上清中所提取到的微囊泡直径为30~100 nm,EXO的膜蛋白标记物CD63和TSG101的表达为阳性;携带PKH67荧光标记的EXO可被hSGSFs摄取,并可在mRNA和蛋白水平上调hSGSFs中FAP的表达.结论:SACC-83来源的EXO可被hSGSFs摄取,并可显著上调hSGSFs中FAP的表达.提示ACC可能通过EXO途径促进正常唾液腺间质成纤维细胞向癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAF)的转化.

作者:宋梦阳;王方圆;侯晋;殷学民

来源:实用口腔医学杂志 2017 年 33卷 1期

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作者:
宋梦阳;王方圆;侯晋;殷学民
来源:
实用口腔医学杂志 2017 年 33卷 1期
标签:
腺样囊性癌 外泌体 成纤维细胞活化蛋白 癌症相关成纤维细胞 Adenoid cystic carcinoma Exosomes Fibroblast activation protein Cancer-associated fibroblasts
目的:研究腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)细胞SACC-83来源的外泌体(exosome,EXO)对人正常唾液腺间质成纤维细胞(human normal salivary gland stromal fibroblasts,hSGSFs)表达成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)的影响.方法:采用超滤管浓缩与EXO提取试剂盒相结合的方法从SACC-83的培养上清中提取EXO,通过透射电镜及Western Blot对所提取的EXO进行鉴定;将SACC-83来源的EXO用荧光染料PKH67标记后与hSGSFs共培养48 h,采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察hSGSFs对于SACC-83来源的EXO的摄取情况;利用qRT-PCR和Western Blot法检测在SACC-83来源的EXO作用下,hSGSFs中FAP的表达变化.结果:SACC-83培养上清中所提取到的微囊泡直径为30~100 nm,EXO的膜蛋白标记物CD63和TSG101的表达为阳性;携带PKH67荧光标记的EXO可被hSGSFs摄取,并可在mRNA和蛋白水平上调hSGSFs中FAP的表达.结论:SACC-83来源的EXO可被hSGSFs摄取,并可显著上调hSGSFs中FAP的表达.提示ACC可能通过EXO途径促进正常唾液腺间质成纤维细胞向癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAF)的转化.