目的:探讨miRNA-133b对骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及凋亡的影响,分析miRNA-133b影响BMSCs增殖的可能机制.方法:体外全骨髓贴壁法原代培养大鼠BMSCs,取生长良好的第2代细胞作为本实验的研究对象.利用siPORT NeoFX转染rno-miRNA-133b模拟物(mimic)、抑制剂(inhibitor)及其各自相对应的阴性对照(NC).用带GFP荧光的miRNA和TaqMan qRT-PCR验证转染效率,采用MTS法和Brdu细胞增殖比色法检测细胞增殖,TUNEL免疫荧光分析细胞凋亡.利用生物信息学方法预测miRNA-133b的靶点基因,并对其靶点基因进行基因功能分析.结果:①利用siPORT NeoFX转染大鼠BMSCs能有效实现细胞中miRNA-133b的过表达和抑制.②过表达miRNA-133b能明显促进BMSCs的增殖(P＜0.05),而抑制miRNA-133b能明显减少BMSCs的增殖(P＜0.05).③miRNA-133b对BMSCs的凋亡无明显作用(P＞0.05).④生物信息学分析结果提示miRNA-133b的靶点中存在部分调节细胞增殖的基因位点.结论:miRNA-133b对BMSCs的增殖能力存在促进作用,其可能通过负调控多种增殖调节靶基因发挥作用.
作者：黄伟聪；王珏；杨凯；旷文安；张浩；孙成超
来源：温州医学院学报 2012 年 42卷 5期
