目的 利用慢病毒感染的方法建立能稳定表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞系,并将其接种到裸鼠皮下检测其成瘤能力.方法 包装表达PSMA的慢病毒和表达荧光素酶的慢病毒,将其感染PC3细胞后,用嘌呤霉素进行筛选,建立能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA--PC3细胞;利用流式细胞术检测PSMA的表达情况.将PSMA+-PC3和PSMA--PC3细胞接种于裸鼠皮下建立荷瘤模型,利用生物发光成像法观察其在体内的成瘤情况,利用免疫组织化学染色法检测PSMA+-PC3和PSMA--PC3肿瘤组织中PSMA的表达情况.结果 成功建立了能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA--PC3细胞,流式细胞术检测证实PSMA+-PC3细胞上PSMA呈阳性表达,小动物活体成像结果显示PSMA+-PC3和PSMA--PC3细胞均可有效成瘤,免疫组织化学染色检测证实PSMA+-PC3肿瘤上PSMA的表达为阳性.结论 成功建立了能稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞系,并在裸鼠体内证实其可有效成瘤,为靶向PSMA的研究提供了有用的细胞和动物模型.
作者:张玲玲;吴介恒;韩东晖;史圣甲;杨发;谢品;席文锦;郭张燕;秦卫军;杨安钢;温伟红
来源:细胞与分子免疫学杂志 2017 年 33卷 4期