目的:观察人皮肤成纤维细胞在二维和三维培养系统中的生长和代谢特性.方法:实验于2005-02/2006-02在华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室完成.从小儿包皮(患者家属知情同意并自愿捐献)真皮层中分离人皮肤成纤维细胞.分别以方瓶和微载体转瓶作为二维培养系统,以胶原-壳聚糖海绵状支架作为三维培养系统,将人皮肤成纤维细胞分别接种至不同系统中进行批培养和换液培养,每隔24 h取样,采用结晶紫染色和MTT法检测细胞的增殖情况,用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析培养上清中葡萄糖和乳酸含量,以观察细胞的代谢情况.结果:对数生长期三维培养系统中人皮肤成纤维细胞平均比生长速率为二维培养系统中的0.25倍,葡萄糖比消耗速率为二维培养系统中的0.93倍,平均乳酸产率为二维培养系统中的1.56倍,细胞对葡萄糖的生长得率为二维培养系统中的0.26倍.比较人皮肤成纤维细胞在两种培养系统中增殖和代谢特性,发现三维培养的细胞比二维培养的细胞生长更缓慢,细胞中进行无氧代谢的葡萄糖占总葡萄糖代谢流量的比例高于二维培养的细胞,因此,葡萄糖代谢能量利用率低于二维培养的细胞.结论:二维培养系统,尤其微载体转瓶中,人皮肤成纤维细胞生长快速,葡萄糖代谢能量利用率高,适合于大量制备组织工程种子细胞.根据细胞在胶原-壳聚糖
作者：吴国平；周燕；谭文松
来源：中国组织工程研究与临床康复 2007 年 11卷 1期
