目的:关于神经干细胞移植治疗脊髓损伤的研究己有一些报道,对细胞移植的时间、方式以及检测的指标各有不同观点.实验观察了低温保存的神经干细胞复苏后移植对大鼠脊髓损伤后轴突再生的影响.方法:实验于2005-0612006-06在中国医科大学实验动物中心完成.①实验材料:选取Wistar成年大鼠36只,雌雄不限,体质量250～300g,由中国医科大学实验动物部提供.新生大鼠10只,用作神经干细胞的分离与培养.实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:将获得的神经干细胞在处于对数生长期阶段-70℃冻存2周,复温后用5-溴脱氧尿嘧啶核苷法标记.制备大鼠脊髓损伤模型,伤后立即进行移植干预,实验分为3组:神经干细胞移植组、DMEM培养液填充组、空白对照组.③实验评估:应用免疫组织化学法观察移植细胞存活及迁移情况,行辣根过氧化物酶逆行示踪法观察脊髓损伤处轴浆运输的重建.结果:36只脊髓横断损伤模型因麻醉过最死亡4只,感染死亡5只,予补足.复苏的神经干细胞经Brdu核标记后移植到脊髓损伤区,在损伤脊髓区域可检测到标记的阳性细胞.第7天可见,第14天增多,第28天逐渐减少并消失.辣根示踪技术显示神经干细胞移植组较DMEM培养液填充组阳性细胞明显增多,组间差异有统计学意义.结论:低温保存的神经干细胞移植到脊髓损伤区域
作者：杨永利；刘宏志；李佐文
来源：中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 3期
