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背景:肿瘤坏死因子α是骨关节炎主要致病因子,主要通过激活核因子KB信号通路活性实现软骨细胞炎症反应。细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1参与调节多种细胞因子诱导的细胞炎症反应。<br>  目的:观察大鼠软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1对炎症因子肿瘤坏死因子α反应中的作用。<br>  方法:将慢病毒包装的低密度脂蛋白受体相关蛋白1-shRNA转染原代培养的软骨细胞。转染3 d后用核因子κB磷酸化抑制剂Bay 11-7082(10μmol/L)预处理的阴性对照组和shLRP1组软骨细胞30 min,肿瘤坏死因子α(30μg/L)分别作用两组软骨细胞30 min,收集总蛋白并进入后续Western blot的实验,测定相关胞内信号蛋白表达情况,收集总RNA并行Real-time PCR实验检测相关RNA表达情况。收集肿瘤坏死因子α(30μg/L)作用软骨细胞12 h的培养基行ELISA检测基质金属蛋白酶13表达水平。<br>  结果与结论:①慢病毒介导敲低低密度脂蛋白受体相关蛋白1后的软骨细胞肿瘤坏死因子α受体1表达增加;②肿瘤坏死因子α作用后的shLRP1组软骨细胞核因子kB通路较对照组均有明显激活,诱导型一氧化氮合酶表达增加;③ELISA检测提示shLRP1组胞外基质金属蛋白酶13浓度增加;④结果提示,软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1低表

作者:杨二平;彭飞;梁杰;杜远立

来源:中国组织工程研究 2016 年 20卷 15期

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作者:
杨二平;彭飞;梁杰;杜远立
来源:
中国组织工程研究 2016 年 20卷 15期
标签:
组织构建 软骨细胞 低密度脂蛋白受体相关蛋白1 肿瘤坏死因子α 慢病毒 NF-kB
背景:肿瘤坏死因子α是骨关节炎主要致病因子,主要通过激活核因子KB信号通路活性实现软骨细胞炎症反应。细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1参与调节多种细胞因子诱导的细胞炎症反应。<br>  目的:观察大鼠软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1对炎症因子肿瘤坏死因子α反应中的作用。<br>  方法:将慢病毒包装的低密度脂蛋白受体相关蛋白1-shRNA转染原代培养的软骨细胞。转染3 d后用核因子κB磷酸化抑制剂Bay 11-7082(10μmol/L)预处理的阴性对照组和shLRP1组软骨细胞30 min,肿瘤坏死因子α(30μg/L)分别作用两组软骨细胞30 min,收集总蛋白并进入后续Western blot的实验,测定相关胞内信号蛋白表达情况,收集总RNA并行Real-time PCR实验检测相关RNA表达情况。收集肿瘤坏死因子α(30μg/L)作用软骨细胞12 h的培养基行ELISA检测基质金属蛋白酶13表达水平。<br>  结果与结论:①慢病毒介导敲低低密度脂蛋白受体相关蛋白1后的软骨细胞肿瘤坏死因子α受体1表达增加;②肿瘤坏死因子α作用后的shLRP1组软骨细胞核因子kB通路较对照组均有明显激活,诱导型一氧化氮合酶表达增加;③ELISA检测提示shLRP1组胞外基质金属蛋白酶13浓度增加;④结果提示,软骨细胞膜蛋白低密度脂蛋白受体相关蛋白1低表