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目的 观察丹酚酸B(SalB)联合重组腺病毒Ad-HGF修饰对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)存活、增殖及向心肌样细胞分化的影响.方法 体外贴壁培养法培养MSCs;实验分单纯MSCs组、Ad-HGF组、SalB组和SalB+Ad-HGF组,用AO/EB染色观察细胞的存活,MTT比色法检测细胞的增殖;细胞分单纯MSCs组、5-Aza组、Ad-HGF组、SalB组、5-Aza+ Ad-HGF组、5-Aza+ SalB组、SMB+ Ad-HGF组,分别诱导MSCs,于诱导后第3周观察细胞形态变化,免疫细胞荧光检测心肌细胞特异性蛋白Desmin和Connexin43、Westem Blot检测蛋白cTnT的表达.结果 培养的MSCs生长良好,AO/EB检测各组细胞生长良好,胞体及胞核正常;MTT提示从第3天开始,Ad-HGF组、SalB组和SalB+ Ad-HGF组OD值较单纯MSCs组和5-Aza组显著增高(p<0.05),5-Aza组较单纯MSCs组降低(p<0.05);加入诱导剂诱导3周后,MSCs由梭形逐渐变圆,部分可见肌管样结构;细胞免疫荧光可见心肌细胞特异性蛋白Desmin和Connexin43表达,Western Blot检测见cTnT表达,Ad-HGF转染组和SalB组蛋白表达较单纯MSCs组增强,但较5-Aza组弱,5-Aza+ Ad-HGF组、5-Aza+ SalB组和SalB+ Ad-HGF组较5-Aza组增强.结论 SalB和HGF对MSCs的存活无明显损伤影响,可以促进MSCs的增殖和向心肌样细胞分化,两者联合作用效果更明显.

作者:邓菊;朱世杰;颜如玉;赵海玉;张建武

来源:血栓与止血学 2020 年 26卷 4期

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作者:
邓菊;朱世杰;颜如玉;赵海玉;张建武
来源:
血栓与止血学 2020 年 26卷 4期
标签:
骨髓间充质干细胞 丹酚酸B 肝细胞生长因子 心肌细胞分化
目的 观察丹酚酸B(SalB)联合重组腺病毒Ad-HGF修饰对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)存活、增殖及向心肌样细胞分化的影响.方法 体外贴壁培养法培养MSCs;实验分单纯MSCs组、Ad-HGF组、SalB组和SalB+Ad-HGF组,用AO/EB染色观察细胞的存活,MTT比色法检测细胞的增殖;细胞分单纯MSCs组、5-Aza组、Ad-HGF组、SalB组、5-Aza+ Ad-HGF组、5-Aza+ SalB组、SMB+ Ad-HGF组,分别诱导MSCs,于诱导后第3周观察细胞形态变化,免疫细胞荧光检测心肌细胞特异性蛋白Desmin和Connexin43、Westem Blot检测蛋白cTnT的表达.结果 培养的MSCs生长良好,AO/EB检测各组细胞生长良好,胞体及胞核正常;MTT提示从第3天开始,Ad-HGF组、SalB组和SalB+ Ad-HGF组OD值较单纯MSCs组和5-Aza组显著增高(p<0.05),5-Aza组较单纯MSCs组降低(p<0.05);加入诱导剂诱导3周后,MSCs由梭形逐渐变圆,部分可见肌管样结构;细胞免疫荧光可见心肌细胞特异性蛋白Desmin和Connexin43表达,Western Blot检测见cTnT表达,Ad-HGF转染组和SalB组蛋白表达较单纯MSCs组增强,但较5-Aza组弱,5-Aza+ Ad-HGF组、5-Aza+ SalB组和SalB+ Ad-HGF组较5-Aza组增强.结论 SalB和HGF对MSCs的存活无明显损伤影响,可以促进MSCs的增殖和向心肌样细胞分化,两者联合作用效果更明显.