目的 探讨钙调磷酸酶调节因子1.4(RCAN 1.4)对食管癌KYSE 30细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 将对数生长期HEK-293T细胞分为HEK-293T-A组和HEK-293T-B组,培养至融合70％ ～80％时,分别加入用慢病毒表达载体质粒[短发卡RNA(shRNA)RCAN1.4]和LentiPac混合包装质粒制备的"DNA质粒-EndoFectin"转染复合物、"空载体质粒-EndoFectin"转染复合物,转染14 h后弃去旧培养基,加入10 mL含体积分数5％ 胎牛血清、105 U·L-1青霉素、100μg·L-1链霉素的达尔伯克改良伊格尔培养基及20μL"Titer Boost"滴度增强剂继续培养,于转染48 h后收集HEK-293T-A组和HEK-293T-B组细胞培养液,离心制备"shRNA-RCAN1.4慢病毒液"和"阴性对照慢病毒液",分别转染体外培养的食管癌KYSE30细胞,获得shRNA干扰RCAN1.4组(shRCAN1.4组)和shRNA干扰阴性对照组(shNC组)KYSE30细胞,采用Western blot法检测2组KYSE30细胞中RCAN1.4蛋白的表达;平板克隆形成实验检测2组KYSE30细胞的克隆形成能力;划痕实验检测2组KYSE30细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测2组KYSE30细胞的侵袭能力.结果 shRCAN1.4组和shNC组KYSE30细胞中RCAN1.4蛋白相对表达量分别为0.28±0.02、0.80±0.06,shRCAN 1.4组KYSE30细胞中RCAN1.4蛋白相对表达量显著低于shNC组(t=21.3

作者：王孝威；刘怡文；万强；周福有

来源：新乡医学院学报 2020 年 37卷 5期