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目的 探讨心肌缺血再灌注损伤环境下白细胞介素(IL)-10诱导的巨噬细胞M2表型极化对小鼠心肌细胞凋亡的影响及机制.方法 根据培养条件,将小鼠巨噬细胞分为对照组(A组)、缺氧/复氧组(B组)、IL-10组(C组),将小鼠心肌细胞分为对照组(D组)、缺氧/复氧组(E组)、缺氧/复氧+IL-10组(F组).A组巨噬细胞培养于常氧(O2体积分数为21%)条件下,B组巨噬细胞培养于缺氧(O2体积分数为3%~5%)条件下,24 h后A组和B组巨噬细胞培养于常氧条件下6 h;C组巨噬细胞培养于常氧条件下,并使用含终质量浓度50 mg·L-1 IL-10新鲜完全培养基培养6h;收集A组、B组、C组巨噬细胞培养基上清液备用.将A组培养基上清液和新鲜完全培养基等体积混合培养D组心肌细胞,将B组培养基上清液和新鲜完全培养基等体积混合培养E组心肌细胞,将B组培养基上清液和C组培养基上清液等体积混合培养F组心肌细胞.采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测A组、B组、C组巨噬细胞中诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、CD86、精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206 mRNA相对表达量;采用酶联免疫吸附试验检测A组、B组、C组以及B组和C组等体积混合上清液(B+C组)中IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-10、转化生长因子(TGF)-β蛋白相对表达量;采用流式细胞术检测D组、E组、F组心肌细胞凋亡情况.

作者:索森森;李爱琴;原玲玲;李世朋;毋领娟;柴文文;宰娇娇;郭鹏

来源:新乡医学院学报 2022 年 39卷 7期

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索森森;李爱琴;原玲玲;李世朋;毋领娟;柴文文;宰娇娇;郭鹏
来源:
新乡医学院学报 2022 年 39卷 7期
标签:
缺血再灌注 缺氧/复氧 巨噬细胞 极化 心肌细胞 凋亡 白细胞介素-10
目的 探讨心肌缺血再灌注损伤环境下白细胞介素(IL)-10诱导的巨噬细胞M2表型极化对小鼠心肌细胞凋亡的影响及机制.方法 根据培养条件,将小鼠巨噬细胞分为对照组(A组)、缺氧/复氧组(B组)、IL-10组(C组),将小鼠心肌细胞分为对照组(D组)、缺氧/复氧组(E组)、缺氧/复氧+IL-10组(F组).A组巨噬细胞培养于常氧(O2体积分数为21%)条件下,B组巨噬细胞培养于缺氧(O2体积分数为3%~5%)条件下,24 h后A组和B组巨噬细胞培养于常氧条件下6 h;C组巨噬细胞培养于常氧条件下,并使用含终质量浓度50 mg·L-1 IL-10新鲜完全培养基培养6h;收集A组、B组、C组巨噬细胞培养基上清液备用.将A组培养基上清液和新鲜完全培养基等体积混合培养D组心肌细胞,将B组培养基上清液和新鲜完全培养基等体积混合培养E组心肌细胞,将B组培养基上清液和C组培养基上清液等体积混合培养F组心肌细胞.采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测A组、B组、C组巨噬细胞中诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、CD86、精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206 mRNA相对表达量;采用酶联免疫吸附试验检测A组、B组、C组以及B组和C组等体积混合上清液(B+C组)中IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-10、转化生长因子(TGF)-β蛋白相对表达量;采用流式细胞术检测D组、E组、F组心肌细胞凋亡情况.