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背景 研究表明,Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)感染可导致角膜上皮细胞(CECs)基质金属蛋白酶(MMPs)表达、分泌和活性改变.黏着斑激酶(FAK)对MMPs的表达、释放和激活起着重要的调节作用.人角膜上皮感染HSV-1后FAK的表达变化鲜有报道. 目的 探讨HSV-1感染对体外培养的人CECsMMP-2和FAK表达的影响. 方法 以HSV-1(F株)感染体外培养的人CECs,应用逆转录PCR(RT-PCR)、免疫印迹法、免疫组织化学法分别于感染后2、20、40 h检测人CECs MMP-2、FAK及磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)的表达情况. 结果 RT-PCR法检测结果显示,感染细胞的MMP-2 mRNA、FAK mRNA较非感染细胞(即加入无病毒无血清培养液的阴性对照组)的表达明显增强,不同时间点间比较差异无统计学意义,组别与时间点间不存在交互作用(MMP-2 mRNA:F时间=0.968,P=0.436;F组别=47.649,P=0.000;F交互作用=0.757,P=0.536.FAK mRNA:F时间 =0.658,P=0.631;F组别 =35.182,P=0.000;F交互作用=1.386,P=0.137).Western blot 法检测结果显示,感染后2h时p-FAK、FAK、MMP-2在感染细胞与非感染细胞间差异均无统计学意义(P>0.05),感染后20 h、40 h感染细胞的蛋白表达较非感染细胞均明显增强(P<0.05).免疫组织化学染色检测结果显示,随着感染时间的延长,MMP-2、FAK、p-FAK蛋白染色阳性

作者:曹婷;邢怡桥;杨燕宁;梅海峰

来源:中华实验眼科杂志 2013 年 32卷 11期

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作者:
曹婷;邢怡桥;杨燕宁;梅海峰
来源:
中华实验眼科杂志 2013 年 32卷 11期
标签:
基质金属蛋白酶-2 黏着斑激酶 Ⅰ型单纯疱疹病毒 角膜炎 Matrix metallo proteinase-2 Focal adhesion kinase Herpes simplex virus-1 Keratitis
背景 研究表明,Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)感染可导致角膜上皮细胞(CECs)基质金属蛋白酶(MMPs)表达、分泌和活性改变.黏着斑激酶(FAK)对MMPs的表达、释放和激活起着重要的调节作用.人角膜上皮感染HSV-1后FAK的表达变化鲜有报道. 目的 探讨HSV-1感染对体外培养的人CECsMMP-2和FAK表达的影响. 方法 以HSV-1(F株)感染体外培养的人CECs,应用逆转录PCR(RT-PCR)、免疫印迹法、免疫组织化学法分别于感染后2、20、40 h检测人CECs MMP-2、FAK及磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)的表达情况. 结果 RT-PCR法检测结果显示,感染细胞的MMP-2 mRNA、FAK mRNA较非感染细胞(即加入无病毒无血清培养液的阴性对照组)的表达明显增强,不同时间点间比较差异无统计学意义,组别与时间点间不存在交互作用(MMP-2 mRNA:F时间=0.968,P=0.436;F组别=47.649,P=0.000;F交互作用=0.757,P=0.536.FAK mRNA:F时间 =0.658,P=0.631;F组别 =35.182,P=0.000;F交互作用=1.386,P=0.137).Western blot 法检测结果显示,感染后2h时p-FAK、FAK、MMP-2在感染细胞与非感染细胞间差异均无统计学意义(P>0.05),感染后20 h、40 h感染细胞的蛋白表达较非感染细胞均明显增强(P<0.05).免疫组织化学染色检测结果显示,随着感染时间的延长,MMP-2、FAK、p-FAK蛋白染色阳性